Մանանա 

Մանկական սննդամթերքում բենզապիրենի որոշում. Բենզ (ա) պիրեն. նրա հատկությունները, քաղցկեղածին ազդեցությունը, որոշման մեթոդները


հ.30-08 վկայական 04.03.2008թ
FR.1.31.2008.01033

1. Ուսումնասիրության օբյեկտներ

Այս չափման ընթացակարգը կիրառվում է ապխտած մսի, ապխտած ձկան և ճարպային մթերքների նկատմամբ և սահմանում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայի որոշումը ֆտորաչափական հայտնաբերմամբ բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման միջոցով:

2. Չափման միջակայք

Ճարպային, ապխտած մսի, ապխտած ձկնամթերքի բենզ(ա)պիրենի MPC-ն 1 մկգ/կգ է:

Մեթոդը ապահովում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայի չափումների արդյունքների ստացում Աղյուսակ 1-ում ներկայացված միջակայքերում:

Աղյուսակ 1. Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայի չափման միջակայքերը

Ապրանքի տեսակը զանգվածային միջակայք
կոնցենտրացիան, մկգ/կգ		 MPC,
մկգ/կգ
ճարպային արտադրանք 0,5 – 2,0 1,0
ապխտած մսամթերք 0,5 – 2,0 1,0
ապխտած ձկնամթերք 0,5 – 2,0 1,0

3. Նմուշի պատրաստում

Արտադրանքի նմուշների նմուշառումը, պահպանումը և պահպանումն իրականացվում է ԳՕՍՏ 7631-ի, ԳՕՍՏ 9792-ի, TU-ի և այլ կարգավորող փաստաթղթերի համաձայն, որոնք կարգավորում են նմուշառումը ապրանքների հատուկ տեսակների համար:

Նմուշի պատրաստումը բաղկացած է նմուշառման փուլերից (նմուշը նախապես հովացվում է մինուս 12-18 °C ջերմաստիճանում 30 րոպե), մանրացում, համասեռացում անջուր նատրիումի սուլֆատով, համասեռացված նմուշի արդյունահանումը կոլբայի մեջ հեքսանով: ուլտրաձայնային բաղնիք, պինդ նստվածքի ինքնաբուխ նստեցում (1-2 րոպեի ընթացքում), էքստրակտի յուղազերծում սառցախցում (գլանի մեջ ավելացնում են սիլիցիումի գել, ավելացնում են էքստրակտը, մխոցի պարունակությունը դրվում է սառցախցիկում), մաքրում է վերևյալ հեքսանային շերտը չպահող պինդ փուլային արդյունահանմամբ (Strata Silica Si-1 փամփուշտների վրա) *, լուծույթի մաքրում օդի կամ իներտ գազի հոսքով:

* Նշում. Երբ սկզբնական վերլուծված արտադրանքում ճարպերի կոնցենտրացիան 5%-ից պակաս է, նախնական նմուշի էքստրակտին սառչելուց հետո պետք է ավելացնել փոքր քանակությամբ լուծվող ռեագենտ՝ էթիլացետատ (0,1 մլ-ից մինչև 6 մլ մաքրված էքստրակտ):


4. Քրոմատոգրաֆիկ անալիզի իրականացում

4.1. Բենզ(ա)պիրենի տրամաչափման լուծույթների HPLC վերլուծության սարքավորումներ և պայմաններ, պատրաստված արտադրանքի նմուշներ:

Բենզո(ա)պիրենի քրոմատոգրաֆիական անալիզի համար անհրաժեշտ է օգտագործել ֆտորաչափական հայտնաբերմամբ իզոկրատական ​​բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիկ համակարգ:

Վերլուծությունն իրականացնելու համար տրամաչափման լուծույթները նախապես պատրաստվում են բենզո(ա)պիրենի GRM լուծույթից հեքսանում կամ բենզո(ա)պիրենի GRM լուծույթից ացետոնիտրիլում (լուծիչը փչում է, ստանդարտ նմուշը նորից լուծվում է հեքսանում։ ); իրականացնել նմուշի պատրաստում; պատրաստել սարքը շահագործման համար.

Սարքավորումներ:

  • հեղուկ քրոմատոգրաֆ «Stayer» ֆտորաչափական դետեկտորով;
  • անհատական ​​համակարգիչ՝ տեղադրված «MultiChrome Windows XP-ի համար» 1.5 կամ 2x ծրագրաշարով:
  • իզոկրատական ​​ռեժիմ;
  • սյունակ՝ Luna C18(2) 150x3.0 մմ 3 մկմ (Phenomenex, ԱՄՆ);
  • պահակային սյուն՝ C18 4x3.0 մմ (Phenomenex, ԱՄՆ);
  • շարժական փուլ՝ ացետոնիտրիլ/ջրային լուծույթ (75:25);
  • հոսքի արագությունը `0.3 մլ / րոպե;
  • հանգույցի ծավալը՝ 10 μl;
  • ջերմաստիճանը՝ 50°C;
  • RFU միջակայքը՝ 0,01;
  • հայտնաբերումը՝ ֆտորաչափական (λex՝ 365±2 նմ; λem՝ 400-460 նմ):

    • Ստուգումն իրականացվում է չափաբերման լուծույթների միջոցով (որոշված ​​կոնցենտրացիաների ողջ տիրույթում) առնվազն երկու շաբաթը մեկ անգամ, ինչպես նաև ռեակտիվների նոր խմբաքանակ օգտագործելիս, սյունակները փոխարինելիս և քրոմատոգրաֆը վերանորոգելուց հետո:

    4.2. Բենզո(ա)պիրենի քանակական պարունակության որոշում արտադրանքի նմուշում:

    Արտադրանքի նմուշի բաղադրիչի (բենզո(ա)պիրեն) քանակական պարունակությունը որոշելու համար կատարվում է տրամաչափման լուծույթներից մեկի քրոմատոգրաֆիկ անալիզ, այնուհետև՝ պատրաստված նմուշի քրոմատոգրաֆիական անալիզ։ Չափումների հուսալիության համար և՛ տրամաչափման լուծույթի, և՛ պատրաստված նմուշի քրոմատոգրաֆիկ անալիզը կատարվում է առնվազն 2 անգամ անընդմեջ:

    Օգտագործելով տեղադրված ծրագրաշարը՝ «MultiChrome Windows XP-ի համար» զեկույցում կամ գագաթնակետից բարձր (կախված «VIEW» ընտրանքների կարգավորումներից), չափման վերջում արդյունքը ավտոմատ կերպով որոշվում է կոնցենտրացիայի տեսքով. քրոմատոգրաֆ ներմուծված նմուշը (բայց ոչ հետազոտության համար վերցված սկզբնական նմուշում):

    Արդյունք ստանալու համար անհրաժեշտ է կատարել առնվազն երկու զուգահեռ չափումներ (ձեռք բերել երկու քրոմատոգրամ)։ Չափման արդյունքը վերցվում է որպես բենզո(ա)պիրենի պարունակության միջին թվաբանական միջինը վերլուծված նմուշի C xp խտանյութում, μg/l (հաշվարկվում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայի երկու արժեքից: վերլուծված նմուշի C 1 և C 2 խտանյութ):
    Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային բաժինը վերլուծված նմուշում (սկզբնական նմուշում) X, մկգ/կգ հաշվարկվում է բանաձևով.

    որտեղ:
    C xp - բենզո(ա)պիրենի կոնցենտրացիայի միջին արժեքը, որը ստացվել է քրոմատագրման արդյունքում երկու զուգահեռ չափումներով [նգ/մլ].
    V 1 – սկզբնական մզվածքի ծավալը, որն իրականում հավասար է առաջնային արդյունահանման համար վերցված հեքանի ծավալին (50 մլ).
    V 2 - սառեցման համար վերցված էքստրակտի (բնօրինակի մի մասը) ծավալը (30 մլ);
    V 3 էքստրակտի ծավալն է (քաղվածքի մի մասը սառչելուց հետո) վերցված SPE-ի համար (6 մլ) [ml];
    V 5 վերջնական էքստրակտի ծավալն է, որի մի մասը ներմուծվում է քրոմատոգրաֆ (մոտ 3 մլ) [մլ];
    K նմուշառում – նմուշառման գործակիցը, որը հաշվի է առնում արդյունահանման համար վերցված արտադրանքի (նատրիումի սուլֆատի հետ խառնված) նմուշի զանգվածի հարաբերակցությունը վերլուծության համար վերցված նմուշի ընդհանուր զանգվածին։ Բոլոր դեպքերում այն ​​հավասար է 0,736;
    K սառեցնել բենզո(ա)պիրենի կորստի գործակիցն է սառեցման ժամանակ: Ուսումնասիրված ապրանքների բոլոր կատեգորիաների համար այս գործակիցը նույնն է և հավասար է 0,95;
    K հավելյալ 1 հեքսանով առաջնային հեղուկի արդյունահանման գործակիցն է։ Ուսումնասիրվող ապրանքների բոլոր կատեգորիաների համար այն նույնն է և հավասար է 0,95-ի;
    Կ TFEextr.2– բենզո(ա)պիրենի պինդ փուլային արդյունահանման գործակիցը հավասար է 0,95;
    մ պր. – վերլուծության համար վերցված հող կամ հող [g]:


    էջ 1



    էջ 2



    էջ 3



    էջ 4



    էջ 5



    էջ 6



    էջ 7



    էջ 8



    էջ 9



    էջ 10



    էջ 11



    էջ 12



    էջ 13



    էջ 14



    էջ 15



    էջ 16



    էջ 17



    էջ 18



    էջ 19

    ԳՕՍՏ 24104.

    Պտտվող գոլորշիացնող IR-1M.

    ԳՕՍՏ 25336.

    Լոգանքի ջուր.

    Մագնիսական հարիչ MM-ZM տեսակի էլեկտրական ջեռուցմամբ։

    Քրոմատոսկոպի ուլտրամանուշակագույն լուսատու՝ 250 - 700 նմ սպեկտրային տիրույթով և BUV-15 լամպով՝ որպես ուլտրամանուշակագույն ճառագայթման աղբյուր։

    Քրոմատոգրաֆիկ ապակե խցիկ 40 x 40 x 40 սմ:

    Ապակե թիթեղներ բարակ շերտով քրոմատոգրաֆիայի համար 5 x ​​20 և 20 x 20 սմ:

    Ապակե քրոմատոգրաֆիկ սյուն 500 մմ երկարությամբ և 20 մմ տրամագծով, ներքևում գծված ծայրով և 50 - 60 սմ տարողությամբ ջրամբար 3 ПШ 14/23:

    Սառնարան ХПТ-2-400-29/32 ХС կամ ХШ-1-400-29/32 ХС համաձայն ԳՕՍՏ 25336.

    AIO-14/23-50 TS կամ AIO-14/23-14/23-65 TS տիպի երկայնքով՝ համաձայն ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Չափիչ քանոն 0,1 սմ մասշտաբով ըստ ԳՕՍՏ 427-ի:

    Dephlegmator 250-19 / 26-29 / 32 TS կամ 300-19 / 26-29 / 32 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Վարդակ P-1-19/26-14/23-14/23 TC կամ H-2-19/26-14/23 TC ըստ ԳՕՍՏ 25336:

    ԳՕՍՏ 25336.

    ԳՕՍՏ 25336. Չափային բալոններ 1-100, 1-250 կամ 3-100, 3-250 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Քիմիական ապակի V-1-100 կամ V-1-150 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Կոլբաներ K-1-100-29/32 THS, K-1-25R-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS կամ P-1-500-29/32 THS համաձայն ԳՕՍՏ 25336:

    Buechner ձագար 1 կամ 2, կամ 3 ըստ ԳՕՍՏ 9147-ի:

    Կշռման բաժակներ (շշերի պարկեր) SV-14/8 կամ SV-19/9, կամ SV-24/10, կամ SV-34/12՝ համաձայն ԳՕՍՏ 25336-ի:

    MSH-10 տիպի միկրոներարկիչներ, ապակե մազանոթներ։

    Թղթի ցուցիչ ունիվերսալ:

    Լաբորատոր ֆիլտր թուղթ ըստ ԳՕՍՏ 12026.

    Սկալպել կամ բարակ սպաթուլա:

    Ռեկտիֆիկացված էթիլային սպիրտ՝ համաձայն ԳՕՍՏ Ռ 51652-ի կամ տեխնիկական ռեկտիֆիկացված էթիլային սպիրտ՝ համաձայն ԳՕՍՏ 18300-ի:

    Acetonitrile ըստ նորմատիվ փաստաթղթի.

    Ցելյուլոզային միկրոբյուրեղային փոշի՝ ըստ նորմատիվ փաստաթղթի։

    ԳՕՍՏ Ռ 51650-2000

    Benz (v) քրիզեն, հիմնական նյութի պարունակությունը ոչ պակաս, քան 98%:

    Սեֆադեքս LH-20.

    ASKG ապրանքանիշի սիլիկատ գել՝ ըստ նորմատիվ փաստաթղթի։

    Թույլատրվում է օգտագործել չափագիտական ​​բնութագրերով այլ չափիչ գործիքներ և տեխնիկական բնութագրերով սարքավորումներ, ինչպես նաև վերը նշվածից ոչ ցածր որակի ռեակտիվներ և նյութեր:

    5.2 Նախապատրաստում թեստի

    5.2.1 Լուծիչների պատրաստում

    Լուծիչները (ն.հեքսան, էթիլային սպիրտ, ացետոն, բենզոլ) թորվում են սովորական եղանակով ռեֆլյուքսային կոնդենսատորով։

    Դիմեթիլֆորմամիդը թորում են՝ թորման կոլբայի մեջ ավելացնելով 120 սմ 3 բենզոլ և 36 սմ 3 ջուր 1 դմ 3 լուծիչի դիմաց:

    5.2.2 Ցելյուլոզ ացետատի պատրաստում

    (50,0 ± 2,0) գ միկրոբյուրեղային ցելյուլոզա տեղադրվում է 500 սմ 3 տարողությամբ հարթ հատակով կոլբայի մեջ, պատրաստված 150 սմ 3 բենզոլի կամ տոլուոլի, 70 սմ 3 քացախաթթվի անհիդրիդ և 0,3 սմ 3 ծծմբաթթվի խառնուրդ: առանձին կոլբայի մեջ ավելացվում է։ Ռեակցիոն խառնուրդը հարում են մագնիսական հարիչով 6-8 ժամ, առանց հարելու թողնում են ևս 18 ժամ, որից հետո հեղուկ փուլը թափվում է, իսկ մնացորդը լցնում են 300 սմ 3 էթիլային սպիրտի մեջ, խառնում, թողնում սպիրտի մեջ։ 24 ժամ, այնուհետև ցելյուլոզը զտվում է Buchner ձագարի վրա, լվանում 100 սմ 3 էթիլային սպիրտով և թորած ջրով, մինչև լվացումները չեզոք լինեն (ըստ ցուցիչի թղթի):

    Այնուհետև ստուգեք ացետիլացված ցելյուլոզայի քրոմատագրական ակտիվությունը: Դրա համար անալիզից 3-4 ժամ առաջ պատրաստում են էթիլային սպիրտի, ացետոնի և ջրի խառնուրդ՝ վերցված 60:25:15 ծավալային հարաբերակցությամբ և լցնում քրոմատոգրաֆիկ խցիկի մեջ, որը պատված է զտիչ թղթի շերտերով։ Լուծողի շերտի բարձրությունը պետք է լինի 1,5–2 սմ մազանոթ մինչև 5 մկլ բենզ (ա) պիրենի 1 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով լուծույթի 5 մկլ։ Թիթեղը տեղադրվում է քրոմատոգրաֆիկ խցիկում և թողնում խցիկում, մինչև լուծիչի մակարդակը բարձրանա սկզբնական գծից առնվազն 100 մմ-ով: Քրոմատոգրաֆիայի վերջում թիթեղը հանվում է, չորանում օդում և ուլտրամանուշակագույն ճառագայթիչի լամպի տակ նշվում է բենզո(ա)պիրենի լյումինեսցենտ կապույտ բիծ։ Չափել հեռավորությունը մեկնարկային գծից մինչև լուծիչի ճակատը և մինչև բենզո(ա)պիրենային կետի կեսը; հաշվարկեք Rj-ի արժեքը, որը գնահատում է բենզո(ա)պիրենի շարժման արագությունը ափսեի վրա՝ համաձայն բանաձևի.

    որտեղ XBP-ն մեկնարկային գծից մինչև բենզո(ա)պիրենային կետի կեսն է հեռավորությունը, մմ;

    L-ն մեկնարկային գծից մինչև լուծիչի ճակատի հեռավորությունն է, մմ:

    Բենզո(ա)պիրենի Rj արժեքը պետք է լինի 0,1:

    Աշխատանքային ափսե պատրաստելու համար 5 գ ացետիլացված ցելյուլոզա կախում են 20 սմ 3 էթիլային սպիրտի մեջ և հավասար շերտով լցնում 20x20 սմ ափսեի վրա։

    5.2.3 Բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի ստանդարտ լուծույթների պատրաստում.

    (10,0+0,2) մգ բենզո(ա)պիրեն և բենզո(բ)քրիզեն կշռում են կշռող բաժակների մեջ (շշերի պարկեր): Նմուշները քանակապես տեղափոխվում են 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ՝ բենզ(ա)պիրեն-բենզոլ, բենզո(գ)քրիզեն-ացետոնիտրիլ, այնուհետև բենզ(ա)պիրենի լուծույթի ծավալը ճշգրտվում է բենզոլով նշագծին, լուծույթի ծավալը բենզ(գ)քրիզեն-ացետոնիտրիլ է։ Ստացված լուծույթներն ունեն 100 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիա։ Լուծումները պահվում են ցուրտ մութ տեղում երեք ամսից ոչ ավելի:

    5.2.4 Բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի աշխատանքային լուծույթների պատրաստում.

    Աշխատանքային լուծույթները պատրաստվում են ստանդարտ լուծույթները նոսրացնելով՝ օգտագործելով 1, 5 և 10 սմ 3 տարողությամբ պիպետներ և 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբաներ, լուծույթի ծավալը համապատասխան լուծիչով ճշգրտվում է նշագծին, խառնվում և պահվում։ սառը մութ տեղում ոչ ավելի, քան մեկ ամիս:

    Բենզո(ա)պիրենի 1,0 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով լուծույթի պատրաստում (որոշվելու է սպեկտրաֆտորաչափությամբ). Ստանդարտ լուծույթից վերցվում է 1,0 սմ 3 և տեղափոխվում 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ։ ; Բենզոլով լուծույթի ծավալը ճշգրտվել է նշագծին։

    0,25:1,0 և 5,0 մկգ/սմ3 զանգվածային կոնցենտրացիայով բենզ(ա)պիրենի լուծույթի պատրաստում (որոշվում է բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրմամբ). ստանդարտ լուծույթից վերցված է 0,25; 1.0; 5,0 սմ 3, համապատասխանաբար, և փոխանցված 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ; լուծույթների ծավալը ացետոնիտրիլով ճշգրտվել է նշագծին:

    Բենզո(բ)քրիզենի 0,5 և 10 մկգ/սմ զանգվածային կոնցենտրացիայով լուծույթների պատրաստումը ստանդարտ լուծույթից վերցվում է համապատասխանաբար 0,5 և 10 սմ 3 և տեղափոխվում 100 սմ3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ; Յուրաքանչյուր լուծույթի ծավալը հասցվել է ացետոնիտրիլով մինչև նշագծին:

    5.2.5 Կալիբրացիոն լուծույթների պատրաստում

    Բենզո (ա) պիրենի և բենզո (բ) քրիզենի խառնուրդի տրամաչափման լուծույթներ պատրաստելու համար բենզո (ա) պիրենի ստանդարտ լուծույթի ծավալները 100 մկգ / սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով և բենզո (բ) աշխատանքային լուծույթը. )քրիզենի զանգվածային կոնցենտրացիան 10 մկգ/սմ 3, ացետոնիտրիլով ծավալը հասցրեք նշագծին: Ստացված լուծույթները խառնվում են և պահվում մութ, սառը տեղում մեկ ամսից ոչ ավելի։

    աղյուսակ 2

    լուծում

    Նախնական լուծույթի ծավալը՝ սմ 3

    Զանգվածի կոնցենտրացիան տրամաչափման լուծույթում, μg/cm 3

    Բենց (ա) պիրենի զանգվածի կոնցենտրացիան 100 մկգ / սմ 3

    Բենց (v) քրիզենի զանգվածային կոնցենտրացիան 10 մկգ / սմ 3

    Բենց(ա)պիրեն

    Benz(v)chrysene

    5.3 Թեստավորման անցկացում

    5.3.1 Բենզո(ա)պիրենի առանձնացում արտադրանքից

    Կլոր հատակով կամ 100 սմ 3 տարողությամբ հարթ հատակով կոլբայի մեջ տեղադրվում է 10 գ կշռող արտադրանքի նմուշ, 4 գ կալիումի հիդրօքսիդից բաղկացած լուծույթ՝ 50 սմ 3 92% էթիլային սպիրտում։ ավելացրել է. Կոլբայի պարունակությունը խառնում են թափահարելով։ Կոլբը միացվում է ռեֆլյուքս կոնդենսատորի և տաքացվում է ջրային բաղնիքի կամ մագնիսական հարիչի վրա, երբ ռեակցիայի խառնուրդը եռում է 3 ժամ, այնուհետև 100 սմ 3 թորած ջուր են ավելացնում կոլբայի մեջ սառնարանի միջոցով: Ռեակցիոն զանգվածը սառչում է սենյակային ջերմաստիճանում։ Սառչելուց հետո ռեակցիայի զանգվածը տեղափոխվում է 500 սմ 3 տարողությամբ բաժանարար ձագար: Եթե ​​հիդրոլիզից հետո ռեակցիայի զանգվածում մնում է պինդ մնացորդ, ապա այն առանձնացնում են Բուխների ձագարի վրա՝ մնացորդը ֆիլտրի վրա լվանալով 30 սմ 3 տաք էթիլային սպիրտով։ Արդյունահանման համար օգտագործվում է ռեակցիայի զանգվածի հեղուկ փուլը։ Բաժանարար ձագարում ավելացնել 30 սմ 3 ն.հեքսան: Ձագարի պարունակությունը թափահարում են և թողնում, որպեսզի հեղուկներն առանձնանան։ Էմուլսիայի առաջացման դեպքում բաժանարար ձագարով խառնուրդին ավելացնում են 20 սմ 3 էթիլային սպիրտ։ Բաժանումից հետո ստորին ջրային-ալկոհոլային փուլը լցվում է կոլբայի մեջ, իսկ հեքսանի էքստրակտը լցվում է մեկ այլ բաժանարար ձագարի մեջ։ Ռեակցիոն զանգվածի այս մշակումն իրականացվում է ևս երկու անգամ՝ արդյունահանման համար օգտագործելով 30 սմ 3 n.hexane և էթիլային սպիրտ՝ էմուլսիան 20 սմ 3 մասերով բաժանելու համար:

    Արդյունահանման ավարտից հետո համակցված հեքսանի էքստրակտը բաժանարար ձագարով լվանում են թորած ջրով երեք անգամ 30 սմ 3-ով, էքստրակտը տեղափոխվում է 100 սմ3 տարողությամբ կլոր հատակով կոլբայի մեջ՝ զտելով անջուր շերտի միջով: նատրիումի սուլֆատ ծակոտկեն ֆիլտրով ձագարի վրա: Լուծույթը գոլորշիացվում է պտտվող գոլորշիչի վրա մինչև 50 սմ 3 ծավալով 60 °C-ից ոչ ավելի ջրային բաղնիքի ջերմաստիճանում:

    Մեկ մաքրված էքստրակտը տեղափոխվում է 500 սմ 3 տարողությամբ բաժանարար ձագարի մեջ և դրան ավելացնում 50 սմ 3 դիմեթիլֆորմամիդի և ջրի խառնուրդ՝ վերցված 9։1 ծավալային հարաբերակցությամբ։ Խառնուրդն ուժգին թափահարում են 1 րոպե, փուլային բաժանումից հետո, ստորինը լցնում են 200 սմ 3 տարողությամբ հարթ հատակով կոլբայի մեջ, իսկ վերին հեքսանից նորից դուրս են հանում դիմեթիլֆորմամիդի և ջրի խառնուրդի 50 սմ 3: շերտ. Հեքսանային շերտը դեն են նետում, հարթ հատակով կոլբայի մեջ համակցված դիմեթիլֆորմամիդային էքստրակտը տեղափոխվում է բաժանարար ձագար, ավելացվում է 100 սմ 3 թորած ջուր, իսկ ջրային փուլից արդյունահանումը կատարվում է հեքսանով երեք անգամ 50 սմ 3-ում: Ջրային փուլը թափվում է, և հեքսանի էքստրակտը լվանում են ջրով երեք անգամ 30 սմ3, տեղափոխում հարթ հատակով կոլբայի մեջ, ավելացնում են 10 գ անջուր նատրիումի սուլֆատ և ինկուբացնում մեկ ժամ, n.հեքսանը գոլորշիացվում է պտտվող սարքի վրա։ գոլորշիացուցիչ 1,5 - 2,0 սմ 3 ծավալով, մնացած լուծիչը հանվում է

    ԳՕՍՏ Ռ 51650-2000

    օդի հոսքը վակուումային միջանցքով, որը միացված է ջրի շիթային պոմպին, կոլբայի մնացորդը լուծվում է 0,5 սմ 3 էթիլային սպիրտի մեջ:

    100 սմ 3 տարողությամբ բաժակի մեջ կշռում ենք (2,5 ± 0,2) գ Sephadex LH-20, ավելացնում ենք 20 սմ 3 էթիլային սպիրտ և թողնում 3-4 ժամ ուռչի, այնուհետև գելը տեղափոխում ենք՝ լվանալով մանրով։ Ալկոհոլի քանակությունը, ապակե քրոմատոգրաֆիկ սյունակի մեջ, թույլ տվեք, որ լուծիչը ցամաքեցվի այնպես, որ սպիրտային շերտը ներծծող շերտի վերևում մնա առնվազն 2 մմ: Կոլբայի մնացորդը քսվում է պատրաստված սյունակի վրա՝ խողովակով, այն կոլբայից երեք անգամ լվանում էթիլային սպիրտով՝ 0,5 սմ 3 չափաբաժիններով: Բազմիցիկլիկ անուշաբույր ածխաջրածինների սյունակից, ներառյալ բենզո(ա)պիրենը, զտումն իրականացվում է 40 սմ 3 էթանոլով, 12 սմ 3 ծավալով առաջին բաժինը դեն նետվում է, իսկ երկրորդը` 25 սմ 3 ծավալով: հավաքվում է. Լուծիչների արտանետման արագությունը 0,5 սմ/րոպե է ապահովվում՝ օդի կամ ազոտի հոսքով մի փոքր գերճնշում կիրառելով փչակին կամ գազի շշին միացված վարդակով: Գազը պետք է մատակարարվի ապակե խողովակի միջոցով, որը լցված է սիլիկա գելով:

    Sephadex LH-20-ով սյունակը կարող է օգտագործվել բազմիցս: Դա անելու համար, կանխելով սորբենտի չորացումը մասնատումից հետո, սյունը լվանում են 25 սմ 3 էթիլային սպիրտով և կիրառվում է հաջորդ նմուշը:

    Երկրորդ ֆրակցիայի լուծույթը տեղափոխվում է 50 սմ 3 տարողությամբ տանձաձև կոլբայի մեջ, լուծիչը գոլորշիացվում է մինչև 0,5 - 1,0 սմ 3 ծավալի, դրա մնացորդը հանվում է օդի կամ ազոտի հոսքով։

    Ստացված բենզո(ա)պիրեն պարունակող ֆրակցիան հետագայում վերլուծվում է բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման կամ սպեկտրաֆտորաչափական մեթոդով:

    Միաժամանակ իրականացվում է հսկիչ փորձ՝ իրականացնելով վերլուծության բոլոր փուլերը՝ օգտագործելով ռեագենտներ՝ ըստ ընթացակարգի, բայց առանց արտադրանքի կշռման։

    5.3.2 Բենզ(ա)պիրենի որոշում բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրմամբ

    5.3.2.1 Քրոմատոգրաֆիայի պայմաններ

    Քրոմատագրման պայմաններն ընտրվում են՝ կախված օգտագործվող հեղուկ քրոմատոգրաֆի և քրոմատոգրաֆիկ սյունակի տեսակից:

    Որպես օրինակ՝ կարող են տրվել բենզո(ա)պիրենի քրոմատոգրաֆիկ որոշման հետևյալ պայմանները.

    Հեղուկ քրոմատոգրաֆ AIex-334 ֆլուորեսցենտային դետեկտորով Kratos FS-970:

    Supelcosil LC-PAM սյունակ, հատիկավորում 5 մկմ, երկարությունը 150 մմ, տրամագիծը՝ 4,6 մմ։

    Ֆլյուորոմետրիկ դետեկտոր՝ գրգռման ալիքի երկարությունը 300 նմ, արտանետման զտիչ՝ 418 նմ։

    Շարժական փուլ՝ ացետոնիտրիլ և ջուր՝ 8։2 ծավալային հարաբերակցությամբ։

    Ելման արագությունը - 2.0 սմ 3 / րոպե:

    Ներարկված նմուշի ծավալը 20 մկլ է:

    Ուժեղացուցիչի զգայունությունն ընտրված է այնպես, որ բենզո (ա) պիրենի և ներքին ստանդարտի` բենզո (բ) քրիզենի ազդանշանների ինտենսիվությունը չգերազանցի սանդղակի 95%-ը:

    Վերլուծության ժամանակը - 15 րոպե; բենզո(ա)պիրենի պահպանման ժամանակը` 5 րոպե, բենզո(բ)քրիզենը` 13 րոպե:

    Վերլուծված լուծույթները նույն պայմաններում երկու անգամ քրոմատագրվում են: Գագաթների տարածքները չափվում են ինտեգրատորի միջոցով կամ ձեռքով որպես գագաթնակետի բարձրության և դրա լայնության արտադրյալը կես բարձրության վրա:

    Բենզո(ա)պիրենի պարունակության որոշումն իրականացվում է ներքին ստանդարտի մեթոդով կամ հավելումների մեթոդով։

    5.3.2.2 Բենզո(ա)պիրենի պարունակության որոշումը 5.3.1-ի համաձայն ստացված լուծույթում (քաղվածք) ներքին ստանդարտ մեթոդով.

    Քանակական գնահատման այս մեթոդի կիրառման ժամանակ քրոմատոգրաֆը նախապես չափորոշվում է` օգտագործելով 5.2.5 կետի համաձայն պատրաստված տրամաչափման լուծույթները:

    5.3.2.1 կետում նշված պայմաններով, յուրաքանչյուր պատրաստված լուծույթի համար գրանցեք երեք քրոմատոգրամ և չափեք բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի գագաթնակետային տարածքները: Որոշեք բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի գագաթների մակերեսի միջին թվաբանականը՝ հաշվարկված երեք քրոմատոգրամներից:

    Կալիբրացիայի գործակիցը K հաշվարկվում է բանաձևով

    որտեղ և և 2-ը բենզ (ա) պիրենի (/l]) և բենզո (բ) քրիզենի (t 2) զանգվածներն են, մկգ, որոնք ներմուծվել են քրոմատոգրաֆ. 5) և ^2 - բենզ (ա) պիրենի (.9]) և բենզո (բ) քրիզենի (A^) գագաթնակետային տարածքներ, սմ 3:

    Յուրաքանչյուր լուծման համար հաշվարկվում է տրամաչափման K գործակիցը:

    Դրա արժեքները չպետք է տարբերվեն բոլոր արդյունքների չափաբերման գործակցի միջին թվաբանականից 10%-ից ավելի:

    300 նմ գրգռման ալիքի երկարությամբ և 418 նմ արտանետման ֆիլտրով, տրամաչափման գործակցի արժեքը 9,5 է:

    Ալկալային հիդրոլիզի համար նմուշների պատրաստման փուլում անալիզն սկսելուց առաջ արտադրանքի նմուշին և հսկիչ նմուշին ավելացվում է 50 մկլ բենզո(բ)քրիզենի 0,5 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով լուծույթ։ Երկու նմուշներն էլ անցնում են 5.3.1 կետում նշված բոլոր փորձարկման քայլերով: Չոր մնացորդը լուծվում է 200 մկլ ացետոնիտրիլի մեջ:

    5.3.2.1-ում նշված պայմաններում գրանցեք բենզ (ա) պիրենի լուծույթի քրոմատոգրամները՝ 100 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով և բենզո (բ) քրիզենի լուծույթով՝ 100 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով։ , նշեք բենզ (ա) պիրենի և բենզ (գ) քրիզենայի ազատման ժամանակը: Այնուհետև գրանցվում են բենզո(բ)քրիզենի հավելումով հսկիչ նմուշի և բենզո(բ)քրիզենի նույն հավելումով արտադրանքի նմուշի քրոմատոգրամները: Չափել բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի գագաթների մակերեսները արտադրանքի նմուշի և հսկիչ նմուշի քրոմատոգրամների վրա:

    Յուրաքանչյուր նմուշի համար գրանցվում է երկու քրոմատոգրամ: Երկու քրոմատոգրամներից հաշվարկվում է բենզո(ա)պիրենի և բենզո(բ)քրիզենի գագաթների մակերեսի միջին թվաբանականը:

    Ստացված տվյալների հիման վրա որոշվում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածը՝ mcg, արտադրանքի m\ նմուշում և հսկիչ փորձի m 2 նմուշում։







    «72-ը բենզո(ա)պիրենի զանգվածն է հսկիչ փորձի նմուշում՝ մկգ; t st-ը բենզո(v)քրիզենի զանգվածն է, որը ներմուծվում է արտադրանքի նմուշում և հսկիչ նմուշում, mcg;

    S"] և S 2 - բենզո(ա)պիրենի գագաթնակետային տարածքներ արտադրանքի նմուշի (.S"]) և հսկիչ նմուշի (.S/), սմ 2 քրոմատոգրամների վրա;

    L/, L/ - բենզ(բ)քրիզենի գագաթնակետային տարածքները արտադրանքի նմուշի (.SS) և հսկիչ նմուշի (L/) քրոմատոգրամների վրա, սմ 2;

    K-ն 5.3.2.2-ի համաձայն սահմանված չափաբերման գործակիցն է:

    5.3.2.3 Բենզո(ա)պիրենի պարունակության որոշումը 5.3.1-ի համաձայն ստացված լուծույթում (քաղվածք) հավելման մեթոդով.

    Ավելացման մեթոդի կիրառման ժամանակ քանակականացման համար հսկիչ փորձի նմուշը վերլուծվում է արտադրանքի նմուշի հետ միաժամանակ: Արտադրանքի նմուշներից մեկուսացված ֆրակցիաները և 5.3.1 կետի համաձայն հսկիչ փուլը լուծվում են 400 մկլ ացետոնիտրիլի մեջ: Ստացված լուծույթները բաժանվում են երկու մասի՝ ավելի փոքր մասը (40 մկլ) վերցնելով փորձանոթի կամ տանձաձև կոլբայի մեջ:

    Գրանցեք արտադրանքի նմուշի քրոմատոգրամները, հսկիչ նմուշները և բենզ(ա)պիրենի լուծույթի քրոմատոգրամը 0,25 մկգ/սմ 3 զանգվածային խտությամբ: Ուշադրություն դարձրեք բենզո(ա)պիրենի թողարկման ժամանակը:

    Արտադրանքի և հսկողության փորձի նմուշի մնացած մասերում (360 մկլ) ավելացվում է 10-20 մկլ բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայի 5 մկգ/սմ 3 լուծույթ: Ստացված լուծույթները կրկին ներմուծվում են քրոմատոգրաֆ:

    Բոլոր քրոմատոգրամները գրանցվում են կրկնօրինակով: Չափվում են բենզո(ա)պիրենի գագաթնակետային տարածքները: Երկու քրոմատոգրամներից հաշվարկվում է բենզո(ա)պիրենի գագաթնակետի տարածքի միջին թվաբանականը:

    Ստացված տվյալների հիման վրա որոշվում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածը՝ μg, արտադրանքի /77] նմուշում և հսկիչ փորձի t 2 նմուշում.

    տ օպ ■ Ս 1 . _ t-ից ■ S 3 (9)

    S 2 - 0,95) ' 2 5 4 - 0,95 3 '


    որտեղ /77 op և /77 k-ը բենզո(ա)պիրենի զանգվածն է, որն ավելացված է արտադրանքի նմուշի քաղվածքի մի մասին (t op) և հսկիչ նմուշը (/%), μg.

    S"] և S 2 - բենզո(ա)պիրենի գագաթնակետային տարածքներ արտադրանքի նմուշի (.S"]) և արտադրանքի նմուշի քրոմատոգրամների վրա բենզո(ա)պիրենի (L/) ավելացումով, սմ 2;

    L/ and.S) - բենզո(ա)պիրենի գագաթնակետային տարածքներ հսկիչ փորձի (L/) նմուշի քրոմատոգրամների վրա և բենզո(ա)պիրենի (L/) ավելացումով հսկիչ փորձի նմուշը, սմ 2;

    0.9-ն այն նմուշի մասնաբաժինն է, որին ավելացվում է բենզ(ա)պիրեն:



    5.3.3 Բենզ(ա)պիրենի պարունակության որոշում սենյակային ջերմաստիճանում սպեկտրաֆտորաչափությամբ

    Բենզո(ա)պիրենի պարունակությունը սպեկտրաֆտորաչափությամբ որոշելիս արտադրանքի նմուշի հետ միաժամանակ վերլուծվում է հսկիչ փորձի նմուշը, որին 50 մկլ բենզո(ա)պիրենի լուծույթ՝ 1 մկգ զանգվածային կոնցենտրացիայով։ /սմ 3 ավելացված է:

    Բենզո(ա)պիրեն պարունակող ֆրակցիաները, որոնք ստացվել են ըստ 5.3.1 կետի արտադրանքի նմուշից և հսկիչ նմուշը հավելումով, լուծվում են 0,5 սմ 3 բենզոլում և այնուհետև ենթարկվում լրացուցիչ զտման ացետիլացված ցելյուլոզայի բարակ շերտում:

    Դա անելու համար 20 x 20 սմ ափսեը, որը պատրաստված է 5.2.2-ում նշվածի համաձայն, բաժանվում է երկու դաշտի՝ 1,5–2 սմ լայնությամբ կողային դաշտ և հիմնական դաշտ, որը մատնահարդարման միջոցով գծում է բաժանարար շերտ սորբենտ շերտի վրա կամ բարակ սպաթուլա: Համաձայն 5.3.1 կետի մեկուսացված ֆրակցիայի լուծույթը շարունակական շերտով կիրառվում է հիմնական դաշտի վրա, որը հեռանում է ափսեի ստորին եզրից 2 սմ և կողային եզրերից 1 սմ: Լուծումը կիրառվում է բարակ գծված մազանոթի կամ միկրոներարկիչի միջոցով, բծերի չափը չպետք է գերազանցի 5 մմ: Նյութի քանակական փոխանցման համար այն երկու անգամ լվանում են կոլբայի պատերից փոքր քանակությամբ բենզոլով (0,4 - 0,6 սմ 3): Կողային դաշտի մեկնարկային գծում կետին քսվում է 5 մկլ բենզո(ա)պիրենի 1 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով լուծույթ։ Լուծողի ամբողջական գոլորշիացումից հետո թիթեղը տեղադրվում է նախահագեցած քրոմատոգրաֆիկ խցիկում 70° - 85° անկյան տակ և էլյուցիան իրականացվում է էթիլային սպիրտի, ացետոնի և ջրի խառնուրդում՝ վերցված 60 հարաբերակցությամբ: 25։15։ Երբ լուծիչի ճակատը հասնում է ափսեի վերին եզրից 2 սմ-ի, այն հանվում է խցիկից, չորանում օդում և բենզո(ա)պիրենային քրոմատոգրաֆիական գոտին մշակվում է ուլտրամանուշակագույն ճառագայթիչ լամպի տակ: Հիմնական դաշտից բենզո(ա)պիրենային գոտուց ստացված սորբենտը քերվում է ափսեից՝ օգտագործելով scalpel կամ բարակ սպաթուլա և տեղափոխվում ապակե ֆիլտր, որտեղից նյութը մի քանի քայլով 50 սմ 3 բենզոլով զտվում է կոլբայի մեջ: 100 սմ 3 տարողությամբ, այնուհետև լուծիչը գոլորշիացվում է փոքր ծավալով, մնացած լուծիչը հանվում է օդի հոսքով և 1 սմ 3 բենզոլ ավելացվում է կոլբայի մեջ։

    386 նմ հուզիչ լույսի ալիքի երկարությամբ սպեկտրոֆտորաչափի վրա 400 - 440 նմ միջակայքում 60 նմ/րոպե սկանավորման արագությամբ, արտադրանքի նմուշի ֆլուորեսցենտային սպեկտրը և հսկիչ նմուշը բենզո(ա)պիրենի ավելացումով։ արձանագրվում են.

    Լուծումների սպեկտրները գրանցվում են ուժեղացման մեկ ռեժիմով՝ կարգավորելով բացը և ուժեղացման գործակիցը ըստ հսկիչ նմուշի լուծույթի, որպեսզի բենզո(ա)պիրենի ազդանշանը 406 նմ-ում լինի գործիքի սանդղակի 0,4 - 0,6: Յուրաքանչյուր լուծման համար սպեկտրը գրանցվում է երկու անգամ՝ հասնելով լավ վերարտադրելիության: Ստացված սպեկտրոգրամների վրա առավելագույնը 406 նմ-ում բենզո(ա)պիրենի սպեկտրային գծի բարձրությունը արտադրանքի նմուշի և հսկիչ նմուշի համար չափվում է միլիմետրերով: Հաշվե՛ք բենզո(ա)պիրենի բարձրությունների միջին արժեքը՝ ըստ երկու սպեկտրոգրամի։ Արտադրանքի մեջ բենզո(ա)պիրենի բարձր մակարդակի դեպքում նմուշները նոսրացվում են բենզոլով և սպեկտրը կրկին գրանցվում է նույն ուժեղացման ռեժիմով, ինչ հսկիչ նմուշում:

    Կատարեք երկու զուգահեռ որոշումներ:

    5.4 Կառավարման արդյունքներ

    5.4.1 Բենզ (ա) պիրենի զանգվածային բաժինը X \,%, կամ X 2, մգ/կգ արտադրանքում, բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման մեթոդի կիրառման դեպքում, հաշվարկվում է բանաձևերով.


    (տ 1 - տ 2) ■ 100 (տ գ - տ 2) տ ■ 1000 1000 «տ 10.






    որտեղ mi-ն բենզո(ա)պիրենի զանգվածն է արտադրանքի նմուշում, μg;

    m2-ը բենզո(ա)պիրենի զանգվածն է հսկիչ նմուշում, μg; t-ը վերլուծության համար վերցված արտադրանքի զանգվածն է, գ.

    5.4.2 Բենզ(ա)պիրենի զանգվածային բաժինը A արտադրանքում, %, կամ X 2, մգ/կգ, սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդի կիրառման ժամանակ հաշվարկվում է բանաձևերով.



    S st NU- 100 s ST // V t ■ 1000 ■ 1000 ■






    որտեղ cst-ը բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան է աշխատանքային լուծույթում, որը պատրաստված է ըստ 5.2.4 կետի և ավելացված է հսկիչ նմուշին, μg/cm 3;

    բենզո(ա)պիրենի սպեկտրային գծի բարձրությունը արտադրանքի նմուշի սպեկտրոգրամի վրա, մմ; բենզո(ա)պիրենի սպեկտրային գծի բարձրությունը հսկիչ փորձի նմուշի սպեկտրոգրամի վրա, մմ;

    V-ն հսկիչ փորձի նմուշին ավելացված բենզ (ա) պիրենի աշխատանքային լուծույթի ծավալն է, սմ 3; t-ը փորձարկման համար վերցված արտադրանքի նմուշի կշիռն է, g.

    Փորձարկման վերջնական արդյունքը վերցվում է որպես երկու զուգահեռ որոշման միջին թվաբանական՝ նույն թվով նշանակալի թվանշաններով:

    Եթե ​​զուգահեռ որոշումների արդյունքների անհամապատասխանությունը չի գերազանցում \X-y - YY 2 |<

    < 0,01 dX, где, Х 2 и X- результаты параллельных определений и их среднее арифметическое, а d - норматив контроля сходимости, то среднее арифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива d приведено в таблице 3.

    Համաձայն X վերլուծության արդյունքի և 3-րդ աղյուսակում տրված հարաբերական d սխալի արժեքի, հաշվարկեք բացարձակ սխալը A = 0, (SH.

    Վերլուծության արդյունքը ներկայացվում է որպես (X ± A), մգ / կգ կամ % P = 0.95-ում:

    5.5 Վերլուծության արդյունքների ճշգրտության վերահսկում

    5.5.1 Կրկնվող որոշումների կրկնելիությունը ստուգվում է 5.3-ի համաձայն վերլուծված յուրաքանչյուր նմուշի համար:

    5.5.2 Աշխատանքային նմուշներն օգտագործվում են վերարտադրելիությունը վերահսկելու համար: Նմուշը բաժանվում է երկու հավասար մասերի և մեթոդոլոգիայի համաձայն վերլուծվում տարբեր լաբորատորիաներում կամ նույն լաբորատորիայում՝ հնարավորինս փոփոխելով անալիզի պայմանները, այսինքն՝ օգտագործելով ծավալային պարագաների տարբեր հավաքածուներ, անալիզները կատարվում են տարբեր օրերի կամ երկու անգամ։ տարբեր վերլուծաբաններ։

    Հսկիչ վերլուծությունների վերարտադրելիությունը համարվում է բավարար, եթե \ X-y - X 2 \<

    < 0,01 DX, где Л), Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднее арифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 3.

    Վերարտադրելիության վերահսկման հաճախականությունը՝ առնվազն երկու շաբաթը մեկ անգամ

    Աղյուսակ 3 - Չափման միջակայք, հարաբերական սխալի բնութագրիչի արժեքը և հարաբերական սխալի պատահական բաղադրիչի գործառնական վերահսկման ստանդարտները (կոնվերգենցիա և վերարտադրելիություն) վստահության մակարդակում P = 0,95

    5.5.3 Ճշգրտությունը վերահսկելու համար օգտագործեք աշխատանքային նմուշներ՝ բենզո(ա)պիրենի հայտնի հավելումով: Նմուշը բաժանված է երկու հավասար մասերի, որոնցից առաջինը վերլուծվում է ընթացակարգին համապատասխան, իսկ բենզո(ա)պիրենի հայտնի հավելումը ներմուծվում է երկրորդի մեջ և այնուհետև նույնպես վերլուծվում է ընթացակարգին համապատասխան: Հավելանյութի արժեքը պետք է լինի վերլուծված նմուշում բենզապիրենի պարունակության 50-150%-ը:

    Վերահսկիչ անալիզների ճշգրտությունը համարվում է բավարար, եթե |L) - X- s \< К, где Л), X и с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена соответственно; К - норматив оперативного контроля точности.

    Մուտքագրված է FSUE «STANDARTINFORM» համակարգչի վրա:

    Տպագրված է FSUE «STANDARTINFORM» մասնաճյուղում - տեսակ. «Մոսկվայի տպիչ», 105062 Մոսկվա, Լյալին, 6

    ԳՕՍՏ Ռ 51650-2000

    Օգտագործման 1 տարածք ...................................... ......... մեկ

    3 Նմուշառում ..................................................... ................................ 2

    4 Ցածր ջերմաստիճանի սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդ .............................. 2

    4.1 Սարքավորումներ, նյութեր և ռեագենտներ ...................................... ... 2

    4.2 Նախապատրաստում թեստին ...................................... ...................... 3

    4.3 Թեստավորման անցկացում ...................................... ............. .... 3

    4.4 Արդյունքների մշակում .............................................. ..................... 6

    4.5 Վերլուծության արդյունքների ճշգրտության ստուգում................................. ..... 6

    5 Բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման և սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդների համար

    սենյակային ջերմաստիճան ...................................................... ................................ 7

    5.1 Սարքավորումներ, նյութեր և ռեագենտներ ...................................... ... 8

    5.2 Նախապատրաստում թեստին ...................................... ...................... ինը

    5.3 Թեստի անցկացում .............................................. ............. ....10

    5.4 Մշակման արդյունքները................................................ ................ ....13

    5.5 Վերլուծության արդյունքների ճշգրտության ստուգում................................ .................14

    6 Անվտանգության պահանջներ ...................................... ................ 15

    7 Օպերատորի որակավորման պահանջներ .............................................. .15

    Հավելված Ա Մատենագիտություն

    ՌՈՒՍԱՍՏԱՆԻ ԴԱՇՆՈՒԹՅԱՆ ՊԵՏԱԿԱՆ ՍՏԱՆԴԱՐՏ

    ՍՆՆԴԻ Մթերքներ Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային բաժնի որոշման մեթոդներ

    Ընդհանուր զանգվածի բենզ(ա)պիրենի մասնաբաժնի որոշման մեթոդներ

    Ներածման ամսաթիվ 2001-07-01

    1 օգտագործման տարածք

    Սույն միջազգային ստանդարտը կիրառվում է սննդի հումքի, սննդամթերքի, սննդամթերքի և համային հավելումների նկատմամբ և սահմանում է բենզո(ա)պիրենի զանգվածային բաժնի որոշման մեթոդներ՝ օգտագործելով սպեկտրաֆտորաչափությունը ցածր և սենյակային ջերմաստիճանում և բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման միջոցով:

    Ճշգրտության 2-րդ դասի ընդհանուր նշանակության լաբորատոր կշեռքներ, որոնց քաշի առավելագույն սահմանաչափը կազմում է 500 գ, համաձայն ԳՕՍՏ 24104.

    Պտտվող գոլորշիացնող IR-1M.

    Լոգանքի ջուր.

    Կենցաղային էլեկտրական վառարան փակ պարույրով և ջեռուցման կարգավորիչով ԳՕՍՏ 14919-ի համաձայն։

    Dewar անոթ ցանկացած տարողությամբ հեղուկ ազոտի համար

    Լոգանքներ քրոմատագրման համար (էմալապատ ֆոտոկուվետներ):

    Ապակե ափսեներ 15 x 30 և 20 x 40 սմ չափսերով:

    Կտաշներ K-1-250-29/32 THS, K-1-100-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS կամ P-1-500-29/32 THS համաձայն ԳՕՍՏ 25336:

    Սառնարաններ KHIT-1-300-14/23 XC կամ KHIT-1-400-14/23 XC ըստ ԳՕՍՏ 25336.

    Սառնարաններ KhPT-2-400-29/32 KhS և KhPT-1-300-29/32 կամ KhPT-400-29/32 KhS համաձայն ԳՕՍՏ 25336:

    Dephlegmator 250-19/26-29/32 TS կամ dephlegmator 300-19/26-29/32 TS ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Ապակե փորձանոթներ P2-10-180 XC համաձայն ԳՕՍՏ 25336.

    Վարդակ P-1-19 / 26-14 / 23 TC կամ H2-19 / 23 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Ջրի շիթային լաբորատոր պոմպ ըստ ԳՕՍՏ 25336.

    1, 2, 5, 10 սմ 3 տարողությամբ պիպետներ ըստ ԳՕՍՏ 29228 և ԳՕՍՏ 29229:

    Ձագար VFO-32-POR 100-14/23 XC կամ VFO-32-POR 160-14/23 XC ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Չափված փորձանոթներ P-2-15-14/23 XC ըստ ԳՕՍՏ 1770-ի:

    Տարանջատող ձագար VD-1-500 կամ VD-3-500 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Չափային բալոններ 1-100, 1-250 կամ 3-100, 3-250 ըստ ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Կշռման բաժակներ (շշերի պարկեր) SV-14/8, կամ SV-19/9, կամ SV-24/10, կամ SV-34/12՝ համաձայն ԳՕՍՏ 25336-ի:

    Ջերմաչափ ջերմաստիճանի չափման սահմանաչափերով 0-250 °С 1 °С բաժանման արժեքով ԳՕՍՏ 29224-ի համաձայն:

    Ապակե մազանոթներ, ապակե ձողեր:

    n.octane, հ., համաձայն նորմատիվ փաստաթղթի.

    ն.հեքսան, հ., ըստ նորմատիվ փաստաթղթի.

    Ռեկտիֆիկացված տեխնիկական էթիլային սպիրտ` ԳՕՍՏ 18300-ի կամ ռեկտիֆիկացված էթիլային սպիրտ` ԳՕՍՏ Ռ 51652-ի համաձայն:

    Նավթային եթերի ֆրակցիա 40 - 70 ° C ըստ նորմատիվ փաստաթղթի:

    Գործունեության 2-րդ աստիճանի քրոմատագրման համար ալյումինի օքսիդ՝ ըստ նորմատիվ փաստաթղթի.

    Բենց (ա) պիրեն, հիմնական նյութի պարունակությունը 98%-ից ոչ պակաս է:

    1,12-Բենզպերիլեն, հիմնական նյութի պարունակությունը 98%-ից ոչ պակաս է:

    Թույլատրվում է օգտագործել չափագիտական ​​բնութագրերով այլ չափիչ գործիքներ և տեխնիկական բնութագրերով սարքավորումներ, ինչպես նաև նշվածից ոչ ցածր որակի ռեակտիվներ և նյութեր:

    4.2 Նախապատրաստում թեստին

    4.2.1 Լուծիչների մաքրում

    Լուծիչները (ն. օկտան, էթիլային սպիրտ, նավթային եթեր, քլորոֆորմ և ն. հեքսան) թորվում են սովորական եղանակով ռեֆլյուքսային կոնդենսատորով։

    4.2.2 Ալյումինի պատրաստում

    Ալյումինան չորացնում են ջեռոցում (250 + 4) ° C ջերմաստիճանում 4 ժամ և պահում են աղացած խցանով տարայի մեջ։

    4.2.3 Բենզ(ա)պիրենի լուծույթի պատրաստում բարակ շերտով քրոմատագրման համար (վկայական լուծույթ):

    Մոտ 10 մգ բենզո(ա)պիրեն կշռում են կշռման շշի մեջ, ավելացնում են մի քանի միլիլիտր նավթային եթեր մինչև նմուշը լիովին լուծարվի։

    Ստացված լուծույթը քանակապես տեղափոխվում է 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ և լուծույթի ծավալը ճշգրտվում է նավթային եթերով նշագծին: Լուծույթի պահպանման ժամկետը սառնարանում երեք ամսից ոչ ավել է։

    4.2.4 Բենզ(ա)պիրենի ստանդարտ լուծույթի պատրաստում

    Կշռման շշի մեջ կշռում են (10,0 ± 0,2) մգ բենզո(ա)պիրեն, ավելացնում են մի քանի միլիլիտր n.octane, մինչև նմուշն ամբողջությամբ լուծարվի: Ստացված լուծույթը քանակապես տեղափոխել են 100 սմ3 տարողությամբ աղացած խցանով ծավալային կոլբայի մեջ և հասցվել ն.օկտանով նշագծին: Ստացված լուծույթում բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան 100 մկգ/սմ 3 է: Լուծումը պահվում է սառնարանում։ Լուծույթի պահպանման ժամկետը երեք ամսից ոչ ավելի է։

    4.2.5 Բենզո(ա)պիրենի աշխատանքային լուծույթների պատրաստում

    Բենզո(ա)պիրենի զանգվածի աշխատանքային լուծույթներ 0,1; 0,04 և 0,02 մկգ/սմ 3 n.octane-ում պատրաստվում են բենզո(ա)պիրենի նախնական ստանդարտ լուծույթի հաջորդական նոսրացումով, որը պատրաստված է 4.2.4 կետի համաձայն, 100 սմ3 տարողությամբ աղացած խցանով ծավալային կոլբայի մեջ: Լուծումները պահվում են սառնարանում։ Լուծումների պահպանման ժամկետը մեկ ամսից ոչ ավելի է։

    4.2.6 1,12-բենզպերիլեն ստանդարտ լուծույթի պատրաստում (ներքին ստանդարտ)

    Նախնական լուծույթը պատրաստելու համար շշի մեջ կշռում են (10,0 + 0,2) մգ 1,12-բենզպերիլեն, ավելացնում են մի քանի միլիլիտր n.octane, մինչև նմուշն ամբողջությամբ լուծվի: Ստացված լուծույթը քանակապես տեղափոխել են 100 սմ3 տարողությամբ աղացած խցանով ծավալային կոլբայի մեջ և հասցվել ն.օկտանով նշագծին: Ստացված լուծույթում 1,12-բենզպերիլենի զանգվածային կոնցենտրացիան 100 մկգ/սմ 3 է: Լուծումը պահվում է սառնարանում։ Լուծույթի պահպանման ժամկետը երեք ամսից ոչ ավելի է։

    4.2.7 1,12-բենզպերիլենի աշխատանքային լուծույթների պատրաստում (ներքին ստանդարտ լուծույթներ)

    1,12-բենզպերիլեն զանգվածային կոնցենտրացիայի աշխատանքային լուծույթներ 0,01; 0,005; 0,002 և 0,001 մկգ / սմ 3

    պատրաստված է n.octane-ով նախնական ստանդարտ լուծույթի հաջորդական նոսրացումներով՝ պատրաստված 4.2.6-ի համաձայն, 100 սմ 3 տարողությամբ աղացած խցանով ծավալային կոլբայի մեջ: Լուծումները պահվում են սառնարանում։ Լուծումների պահպանման ժամկետը մեկ ամսից ոչ ավելի է։

    4.3 Թեստավորման անցկացում

    4.3.1 Բենզո(ա)պիրենի առանձնացում արտադրանքից

    500 սմ 3 տարողությամբ կլոր հատակով կոլբայի մեջ լցնում ենք 25 գ կշռող արտադրանքի նմուշը, կոլբին ավելացնում ենք 20 սմ 3 թորած ջուր, 200 սմ 3 էթիլային սպիրտ և 20 գ կալիումի հիդրօքսիդ։

    Կոլբայի պարունակությունը խառնում են թափահարելով։ Կոլբը միացված է ռեֆլյուքսային կոնդենսատորին և տաքացվում է ջրային բաղնիքի վրա, երբ ռեակցիայի խառնուրդը եռում է 3 ժամ, այնուհետև կոնդենսատորի միջոցով կոլբայի մեջ ավելացվում է 150 սմ 3 ջուր; կոլբը հանվում է լոգանքից և սառչում սենյակային ջերմաստիճանում:

    Սառչելուց հետո ռեակցիայի խառնուրդի հեղուկ փուլը դեկանտացիայի միջոցով տեղափոխվում է բաժանարար ձագար՝ թողնելով արտադրանքի մնացած մասը կոլբայի մեջ: Կոլբայի մեջ մնացորդով ավելացվում է 150 սմ3 n-հեքսան, կոլբայի պարունակությունը ակտիվորեն խառնվում է և n-հեքսանը թափվում է բաժանարար ձագարի մեջ:

    Ձագարը խցանվում է և ուժգին թափահարում, այնուհետև ամրացվում է դարակի մեջ և թողնում հեղուկները բաժանելու համար: Ստացված էմուլսիան առանձնացնելու համար բաժանարար ձագարով խառնուրդին ավելացնում են 20 սմ 3 էթիլային սպիրտ։ Բաժանվելուց հետո ստորին ջրային-ալկոհոլային փուլը նստվածքով նորից լցվում է կոլբայի մեջ, իսկ հեքսանի էքստրակտը լցնում են 500 սմ 3 կոլբայի մեջ:

    Ռեակցիոն խառնուրդի այս մշակումն իրականացվում է ևս երկու անգամ՝ օգտագործելով 100 սմ 3 n-հեքսան՝ արդյունահանման համար և էթիլային սպիրտ՝ էմուլսիայի բաժանման համար՝ 20 սմ 3 չափաբաժիններով:

    Արդյունահանման վերջում կոլբայի մնացորդը և հիդրոլիզատը դեն են նետվում, և էքստրակտը լվանում է բաժանարար ձագարով թորած ջրով երեք անգամ 50 սմ 3-ով և մաս-մաս գոլորշիացվում կլոր հատակով կոլբայի մեջ՝ տարողությամբ: 250 սմ 3 նախապես կշռված մինչև երկրորդ տասնորդական տեղը պտտվող գոլորշիչի վրա ջրային բաղնիքի 60 °С-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում: Քաղվածքով կոլբը թողնում ենք գոլորշիների մեջ՝ լուծիչի հետքերը հեռացնելու համար, որից հետո այն կրկին կշռում են։ Արդյունահանվող մզվածքի քաշը որոշվում է կշռման տարբերությամբ։

    Կոլբայի մեջ գտնվող քաղվածքից 1/5 մասը վերցվում է շշով առանց կշռման։ Քաղվածքի մնացորդով կոլբը կշռվում է։ Էքստրակտի մի մասով շշի մեջ ավելացնել 0,1-0,2 սմ 3 բենզ(ա)պիրենի «վկա» լուծույթ՝ պատրաստված 4.2.3-ին համապատասխան։ Շշի պարունակությունը և կոլբայի մնացորդը լուծվում են փոքր ծավալով նավթային եթերի մեջ:

    Քաղվածքի քրոմատոգրաֆիկ տարանջատման համար ալյումինի օքսիդը հավասարաչափ լցնում են 20x40 սմ չափսի ապակե ափսեի վրա։ Այնուհետև, օգտագործելով 1 մմ հաստությամբ և 3 մմ լայնությամբ ռետինե օղակներով երեք մասի (14, 1 և 3 սմ) բաժանված ապակե ձող, զգուշորեն հարթեցնում են ալյումինի օքսիդը։

    Ստացված լուծույթները քանակապես քսվում են պատրաստված ափսեի վրա ապակե մազանոթներով՝ նեղ մասում՝ լուծույթ շշից («վկա»), լայն մասում՝ արտադրանքի քաղվածք կոլբայից։ Լուծումները հավասարաչափ կիրառվում են շարունակական շերտով, ափսեի ստորին եզրից 7-8 սմ նահանջելով։

    Թիթեղը տեղադրվում է քրոմատոգրաֆիայի լոգարանում թեթև 20° - 25° անկյան տակ, նավթային եթեր է լցվում, որպեսզի այն չհասնի նմուշի կիրառման գծին: Բաղնիքը պատում են ապակիով և կատարվում է քրոմատագրություն՝ լուծիչի ճակատը հասցնելով ափսեի վերին եզրին։

    Առանց թիթեղը չորացնելու, այն ճառագայթվում է ուլտրամանուշակագույն լույսով, և բենզո(ա)պիրենի տեղը փորձանմուշում որոշվում է լուսավոր «վկա» ժապավենով: Փորձարկվող նմուշի քրոմատոգրամի վրա նշեք բենզո(ա)պիրենի ժապավենի սահմանները: Թիթեղը չորացվում է օդում, գոլորշիների գլխարկով:

    Փորձարկման նմուշի քրոմատոգրամի վրա նշված ալյումինի օքսիդի շերտը հանվում է ափսեից ապակե սլայդի միջոցով և քանակապես տեղափոխվում զտիչ ձագարի ծակոտկեն թիթեղ: Ձագարը միացված է 100 սմ 3 տարողությամբ կլոր հատակով կոլբայի հետ, և բենզո(ա)պիրենը կավահողից զտվում է 50 սմ3 բենզոլով, փոքր չափաբաժիններով բենզոլ ավելացնելով և ձագարով կավահողն խառնելով ձագարի վրա: Բենզոլը գոլորշիացվում է մինչև չորանալը պտտվող գոլորշիչի վրա ջրի բաղնիքի 60 °C-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում: Կոլբայի մնացորդը քանակապես օկտանով տեղափոխվեց փորձանոթ: Փորձանոթում լուծույթի ծավալը չպետք է գերազանցի 5 սմ 3-ը:

    Որոշ արտադրանքների վերլուծության ժամանակ չկա նմուշի լյումինեսցենտային բաղադրիչների ամբողջական և հստակ տարանջատում արտադրանքից մեկուսացված էքստրակտի առաջնային քրոմատագրման ժամանակ: Այս դեպքում ալյումինի օքսիդի ավելի լայն շերտը մեկուսացված է ափսեի վրա «վկա» մակարդակով. բենզ(ա)պիրենը կավահողից զտվում է բենզոլով, ինչպես նկարագրված է վերևում, և գոլորշիացման մնացորդը լուծվում է էթանոլում և ստացված ալկոհոլային էքստրակտը վերաքրոմատոգրաֆվում է:

    Սպիրտային էքստրակտի քրոմատոգրաֆիկ տարանջատման համար օգտագործվում է 15 x 30 սմ չափի ափսե՝ 0,3 մմ հաստությամբ ալյումինի օքսիդի շերտով։ Ափսեի վրա առանձնացված են 10 և 3 սմ լայնությամբ երկու շերտ: Վերլուծված արտադրանքի ալկոհոլային էքստրակտը կիրառվում է ափսեի լայն մասում՝ օգտագործելով ապակե մազանոթ, և բենզ (ա) պիրենի լուծույթը նավթային եթերի մեջ («վկա» լուծույթ) կիրառվում է ափսեի նեղ հատվածի վրա: Թիթեղը տեղադրվում է լոգարանում 20 - 25 ° անկյան տակ և քրոմատագրում է կատարում քլորոֆորմով, լուծիչի ճակատը հասցնելով ափսեի վերին եզրին: Ուլտրամանուշակագույն լույսի ներքո «ականատեսը» նշում է հետազոտվող արտադրանքի բենզո (ա) պիրենով ալյումինի օքսիդի ժապավենը։ Այնուհետև բենզո(ա)պիրենը կավահողից զտվում է բենզոլով և հետագա բոլոր գործողությունները կատարվում են վերը նկարագրվածի պես:

    ԳՕՍՏ Ռ 51650-2000

    Բենզո(ա)պիրենի լուծույթը n.octane-ում տեղափոխվում է փորձանոթ: Լուծման ծավալը չպետք է գերազանցի 5 սմ 3-ը 25 գ արտադրանքի նախնական նմուշով:

    Ստացված լուծույթում (քաղվածք) բենզ(ա)պիրենի պարունակությունը որոշվում է ցածր ջերմաստիճանի սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդով՝ օգտագործելով հավելման մեթոդը կամ քանակական գնահատման ներքին ստանդարտ մեթոդը։

    4.3.2 Բենզո(ա)պիրենի պարունակության որոշումը 4.3.1 կետի համաձայն ստացված լուծույթում (քաղվածք) հավելման մեթոդով:

    Երեք փորձանոթներում 1 սմ 3 բենզո(ա)պիրենի ստացված լուծույթը խողովակով լցնել n.octane-ի մեջ։ Այնուհետև 2 սմ 3 n.octane լցնում են առաջին փորձանոթի մեջ։ Երկրորդ փորձանոթի մեջ լցնում են 1,5 սմ 3 n.octane և 0,5 սմ 3 բենզ(a)pyrene-ի աշխատանքային լուծույթ, զանգվածային կոնցենտրացիան 0,1 մկգ/սմ 3, պատրաստված ըստ 4.2.5-ի: Երրորդ փորձանոթում ավելացրեք 1 սմ 3 ն.օկտան և 1 սմ 3 բենզո(ա)պիրենի նույն աշխատանքային լուծույթ, ինչ երկրորդ փորձանոթում:

    Սպեկտրաֆլորիմետրիկ վերլուծությունը սկսվում է երրորդ փորձանոթից: Դա անելու համար երրորդ փորձանոթը տեղադրվում է Dewar անոթի մեջ հեղուկ ազոտով սպեկտրոֆոտոմետրի մուտքի ճեղքի դիմաց; սահմանել բենզո(ա)պիրենի անալիտիկ ֆլուորեսցենտային գիծը 403 նմ հուզիչ լույսի 367 նմ ալիքի երկարության վրա: Ընդլայնումը կարգավորելով և բացվածքը բացելով, ինչպես նաև Dewar նավի մեջ փորձանոթը միաժամանակ կարգավորելով, առավելագույն ազդանշանը հասնում է սպեկտրոֆոտոմետրի ձայնագրող սարքի միջոցով (մինչև 50 - 80%), որից հետո բենզի սպեկտրոգրամը ( ա) պիրենը գրանցվում է 401 - 404 նմ տարածքում՝ ամրագրելով ձայնագրող սարքի սպեկտրոֆոտոմետրի արժեքը 401 նմ ալիքի երկարության վրա։ Սպեկտրի ձայնագրությունը կրկնվում է երկու անգամ։

    Այնուհետև երկրորդ և առաջին փորձանոթները հաջորդաբար սառեցվում են հեղուկ ազոտի մեջ և ֆլյուորեսցենտային սպեկտրները գրանցվում են 401-404 նմ ալիքի երկարության միջակայքում, համոզվեք, որ ձայնագրիչ գրիչը դրեք 401 նմ ալիքի երկարության վրա նույն դիրքում, ինչ նմուշը սկանավորելիս: երրորդ փորձանոթում:

    Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան վերլուծված էքստրակտում որոշվում է ըստ գրաֆիկի, որի վրա բենզո(ա)պիրենի ավելացման արժեքը (մկգ) գծագրված է աբսցիսային առանցքի երկայնքով, և գագաթնակետի բարձրությունը. բենզո(ա)պիրենի առավելագույն բնութագրական գիծը 403 նմ գծագրվում է օրդինատների առանցքի երկայնքով, որը չափվում է ստացված սպեկտրոգրամներից միլիմետրերով:

    Եթե ​​բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան փորձարկման լուծույթում ընկնում է չափումների համար հարմար հատվածում, ապա ստացված փորձնական կետերը գտնվում են նույն ուղիղ գծի վրա: Այս ուղիղ գծի էքստրապոլացիան աբսցիսային առանցքի հետ խաչմերուկում տալիս է հատված, որը համապատասխանում է բենզո (ա) պիրենի պարունակությանը առանց հավելումների լուծույթում, այսինքն՝ փորձարկման լուծույթի 1 սմ 3-ում: Եթե ​​վերլուծված լուծույթում բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան ավելի բարձր է, քան սարքի կողմից չափվող կոնցենտրացիաների միջակայքի վերին սահմանը, ապա վերլուծված լուծույթը նոսրացվում է n.octane-ով:

    4.3.3 Բենզո(ա)պիրենի պարունակության որոշումը 4.3.1-ին համապատասխան ստացված լուծույթում (քաղվածք) ներքին ստանդարտ մեթոդով.

    Որպես ներքին ստանդարտ օգտագործվում է 1,12-benzperylene: 4.3.1-ի համաձայն ստացված բենզ(ա)պիրենի լուծույթը 3 սմ 3 լցնում ենք փորձանոթի մեջ և սպեկտրոֆոտոմետրի մուտքի ճեղքի դիմաց տեղադրում ենք հեղուկ ազոտով Dewar տարայի մեջ, սահմանում անալիտիկ գծեք 403 նմ 367 նմ հուզիչ լույսի ալիքի երկարությամբ և գրանցեք լուծույթի սպեկտրը 401 - 409 նմ ալիքի երկարության միջակայքում: Գծի ինտենսիվությունից (ըստ բենզո(ա)պիրենի բնորոշ գծի առավելագույնի բարձրության 403 նմ-ում) գնահատվում է բենզո(ա)պիրենի մոտավոր պարունակությունը նմուշում։ Համաձայն այս գնահատման, այնուհետև փորձանոթին ավելացվում է 1,12-բենզպերիլենի լուծույթ՝ 3 սմ 3 բենզ(ա)պիրենի լուծույթով n.octane-ում այնպիսի քանակությամբ, որ 1,12-ի ինտենսիվությունը: բենզպերիլեն նմուշի սպեկտրում ժամը

    406,3 նմ 3–5 անգամ ավելի մեծ էր, քան բենզ(ա)պիրենի գծի ինտենսիվությունը 403 նմ ալիքի երկարության վրա։

    Սպեկտրը երկու անգամ գրանցվում է 401 - 409 նմ ալիքի երկարության միջակայքում:

    Բենզ(ա)պիրենի բնորոշ գծերի ինտենսիվությունը 403 նմ-ում և 1,12-բենզպերիլենը ժամը

    Սպեկտրոգրամներից որոշվում է 406,3 նմ (համապատասխանաբար H| և H 2)՝ գագաթների բարձրությունները այս միացությունների բնութագրական գծերի մաքսիմումներում միլիմետրերով չափելով: Հաշվարկներում վերցրեք միջին արժեքը: Հաշվարկված է բենզ (ա) պիրենային (EGD) գծի ինտենսիվության գործակիցը (K) 1,12-բենզպերիլենային (EG 2) գծի ինտենսիվությանը, K = //]/// 2:

    Այնուհետև այս գործակիցը որոշվում է բենզո(ա)պիրենի (X st) ստանդարտ լուծույթների համար: Դրա համար 0,02 և 0,04 մկգ/սմ 3 զանգվածային կոնցենտրացիայով բենզ (ա) պիրենի ստանդարտ լուծույթների 3 սմ 3 լցնում են երկու փորձանոթների մեջ։ Փորձանոթներից յուրաքանչյուրի մեջ լցվում է նույն քանակությամբ 1,12-բենզպերիլեն, ինչ փորձանմուշով: Յուրաքանչյուր լուծույթի սպեկտրները երկու անգամ գրանցվում են 401 - 409 նմ ալիքի երկարության միջակայքում:

    Միևնույն ժամանակ անհրաժեշտ է ապահովել, որ ձայնագրիչի դիրքը 401 նմ ալիքի երկարության վրա բոլոր դեպքերում ամրագրվի նույն մակարդակի վրա։

    Այնուհետև սպեկտրոգրամներից որոշվում է բենզ(ա)պիրենի բնորոշ գծերի ինտենսիվությունը 403 նմ և 1,12-բենզպերիլեն 406,3 նմ (համապատասխանաբար W և H 2): Հաշվարկներում վերցրեք միջին արժեքը: Հաշվեք K st \u003d H ^ H 2 բենզո (ա) պիրենի յուրաքանչյուր կոնցենտրացիայի համար:

    Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիան վերլուծված լուծույթում c, μg/cm 3, հաշվարկվում է բանաձևով.

    s st *K/K st, (1)

    որտեղ c st-ը բենզո(ա)պիրենի կոնցենտրացիան է ստանդարտ լուծույթում, μg/cm 3;

    K-ն վերլուծված լուծույթի սպեկտրոգրամից հայտնաբերված գործակիցն է՝ 1,12-բենզպերիլենի ավելացումով.

    K C1 - 1,12-բենզպերիլենի հավելումով բենզ(ա)պիրենի ստանդարտ լուծույթի սպեկտրոգրամներից հայտնաբերված գործակից, որի արժեքն ավելի մոտ է վերլուծված լուծույթի գործակցին համապատասխան 1 հավելումով, 12-բենզպերիլեն.

    Կատարվում են երկու զուգահեռ որոշումներ և միաժամանակ հսկիչ փորձ, որն իրականացվում է վերլուծության բոլոր փուլերում՝ օգտագործելով բոլոր ռեակտիվները՝ ըստ ընթացակարգի, բայց առանց արտադրանքի նմուշի:

    4.4 Կառավարման արդյունքներ

    Բենզ (ա) պիրեն L),%, X և X 2, մգ / կգ զանգվածային բաժինը հաշվարկվում է բանաձևերով.

    = (ս - եր) ■ մ լ Վ ■ 100 = (ս - եր) ■ տ 1 ■ Վ (2)

    3 տ 2 ■ տ ■ 1000 ■ 1000 տ 2 ■ տ ’

    _ (ս - ս 0) ■ V ■ տ 1 (3)

    որտեղ c-ը բենզո(ա)պիրենի կոնցենտրացիան է, որը հաստատվել է ըստ 4.3.2 կամ 4.3.3 կետի 4.3.1-ի համաձայն ստացված վերլուծված արտադրանքի լուծույթում (քաղվածք), մկգ/սմ 3. c 0-ը բենզո(ա)պիրենի կոնցենտրացիան է հսկիչ փորձի լուծույթում, որը ստացվել է ըստ 4.3.1, μg/cm3; V-ը բենզո(ա)պիրենի լուծույթի ծավալն է, որը մեկուսացված է արտադրանքի վերլուծված նմուշից, սմ 3;

    /«I - վերլուծված արտադրանքից մեկուսացված էքստրակտի քաշը, g; մ 2 - քաղվածքի զանգվածը, որը կիրառվում է ափսեի լայն շերտի վրա, գ; t-ն արտադրանքի նմուշի զանգվածն է, գ.

    Արդյունքը կլորացվում է մինչև երկրորդ նշանակալի ցուցանիշը:

    Որոշման վերջնական արդյունքի համար վերցվում է նույն թվով նշանակալի թվանշաններով երկու զուգահեռ որոշումների միջին թվաբանականը։

    Եթե ​​զուգահեռ որոշումների արդյունքների անհամապատասխանությունը չի գերազանցում |Ա) - X 2 \.<

    < 0,01яЖ, где Xi, Х 2 и X- результаты первого и второго параллельных определений и их среднеарифметическое, a d- норматив контроля сходимости, то среднеарифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива контроля сходимости d приведено в таблице 1.

    Ելնելով X վերլուծության արդյունքից և Աղյուսակ 1-ում տրված հարաբերական d սխալի արժեքից, հաշվարկվում է բացարձակ սխալ A = 0, (SD մգ/կգ կամ %):

    Վերլուծության արդյունքը ներկայացվում է որպես (X ± A), մգ / կգ կամ % P = 0.95-ում:

    4.5 Վերլուծության արդյունքների ճշգրտության վերահսկում

    Վերլուծության արդյունքների որակի ներքին գործառնական հսկողությունը (IQA) ներառում է վերլուծության արդյունքների կոնվերգենցիայի, վերարտադրելիության և ճշգրտության վերահսկում:

    4.5.1 Կրկնվող որոշումների կրկնելիությունը ստուգվում է 4.4-ի համաձայն վերլուծված յուրաքանչյուր նմուշի համար:

    4.5.2 Վերարտադրելիության ներքին հսկողության համար օգտագործվում են աշխատանքային նմուշներ: Նմուշը բաժանվում է երկու հավասար մասերի և մեթոդոլոգիայի համաձայն վերլուծվում տարբեր լաբորատորիաներում կամ նույն լաբորատորիայում՝ հնարավորինս փոփոխելով վերլուծության պայմանները, այսինքն՝ օգտագործելով տարբեր ծավալային պարագաներ, անալիզները կատարվում են տարբեր օրերի կամ երկու տարբեր վերլուծաբանների կողմից։

    Հսկիչ վերլուծությունների վերարտադրելիությունը համարվում է բավարար, եթե \X^ - X 2 \<

    < 0,01 DX, где X/, Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднеарифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 1.

    ԳՕՍՏ Ռ 51650-2000

    Վերարտադրելիության վերահսկման հաճախականությունը առնվազն երկու շաբաթը մեկ է:

    Աղյուսակ 1 - Չափման միջակայք, հարաբերական սխալի բնութագրիչի արժեքը և հարաբերական սխալի պատահական բաղադրիչի գործառնական վերահսկման ստանդարտները (կոնվերգենցիա և վերարտադրելիություն) վստահության մակարդակում Р = 0,95:

    4.5.3 Ճշգրտությունը վերահսկելու համար օգտագործեք աշխատանքային նմուշներ՝ բենզո(ա)պիրենի հայտնի հավելումով: Նմուշը բաժանված է երկու հավասար մասերի, որոնցից մեկը վերլուծվում է ընթացակարգին համապատասխան. Երկրորդում ներմուծվում է բենզո(ա)պիրենի հայտնի հավելում և այնուհետև վերլուծվում ընթացակարգին համապատասխան: Հավելանյութի արժեքը պետք է լինի վերլուծված նմուշում բենզապիրենի պարունակության 50-150%-ը:

    Վերահսկիչ վերլուծությունների ճշգրտությունը համարվում է բավարար, եթե \Xy-X-c\< 0,01 К, где Ху, Xи с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена, соответственно; К- норматив оперативного контроля точности. Норматив оперативного контроля точности рассчитывают по формулам: при проведении внутрилабораторного контроля (Р = 0,90)

    K \u003d 0,84 V (A X]) 2 + (A x) 2; (4)

    արտաքին հսկողության ժամանակ (P = 0.95)

    K \u003d V (A ^) 2 + (A z) 2, (5)

    որտեղ A^ + A x-ը զանգվածային կոնցենտրացիային համապատասխանող սխալի բնութագրիչի արժեքներն են

    բենզո(ա)պիրեն հավելումով և իրական նմուշում նմուշում.

    Ay, \u003d 0,01 Xy և A x \u003d 0,01d x X, որտեղ Xy-ը և X-ը բենզո (a) պիրենի զանգվածային բաժինն են նմուշում` ավելացնելով

    իսկ իրական նմուշում՝ % կամ մգ/կգ։

    d x (8y) հարաբերական սխալի արժեքը տրված է Աղյուսակ 1-ում:

    Վերլուծության ճշգրտությունը վերահսկվում է առնվազն ամիսը մեկ անգամ, ինչպես նաև ռեակտիվները փոխելիս կամ աշխատանքի երկար ընդմիջումից հետո:

    Ճշգրտության գործառնական հսկողության չափորոշիչները գերազանցելու դեպքում կրկնակի վերլուծություններ են կատարվում: Եթե ​​նշված չափորոշիչները բազմիցս գերազանցվում են, անալիզները կասեցվում են, պարզվում են անբավարար արդյունքների տանող պատճառները և դրանք վերացվում են։

    WQA-ի արդյունքները գրանցվում են հատուկ ամսագրում։

    5 Բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման և սպեկտրաֆտորաչափության տեխնիկա սենյակային ջերմաստիճանում

    Մեթոդի էությունը կայանում է նրանում, որ ածխաջրածինները, ներառյալ բենզո(ա)պիրենը, արդյունահանումը հեքսանով կալիումի հիդրօքսիդի սպիրտային լուծույթով մշակված արտադրանքից, բենզո(ա)պիրեն պարունակող պոլիցիկլիկ արոմատիկ ածխաջրածինների մասնաբաժնի մեկուսացումը, և առաջացած ֆրակցիայի մաքրումը սյունակի վրա սյունակի վրա խառնող կեղտից Sephadex-ով և ացետիլացված ցելյուլոզայի բարակ շերտում, որին հաջորդում է մեկուսացված բենզո(ա)պիրենի քանակական որոշումը բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման կամ սպեկտրաֆտորաչափության միջոցով սենյակային ջերմաստիճանում:

    Վերլուծված արտադրանքներում բենզո(ա)պիրենի զանգվածային բաժնի որոշված ​​արժեքների միջակայքը՝ օգտագործելով բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրման մեթոդը և սենյակային ջերմաստիճանում սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդը, կազմում է 0,0001-0,002 մգ/կգ կամ 0,1 x 10-7: - 2.0 x 10 -7% . Բենզո(ա)պիրենի որոշված ​​զանգվածային կոնցենտրացիաների օպտիմալ միջակայքը լուծույթում բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի մեթոդի կիրառման ժամանակ կազմում է 0,01-0,02 մկգ/սմ 3, սպեկտրաֆտորաչափության մեթոդի կիրառման դեպքում՝ 0,02-0,2 մկգ/սմ 3:

    Բենզոպիրենը պատկանում է պոլիցիկլիկ անուշաբույր ածխաջրածինների՝ PAH-ների դասին։ Սա օրգանական միացությունների խումբ է, որի քիմիական կառուցվածքում կան բենզոլային օղակներ՝ երեք կամ ավելի օղակների խմբեր։ Բենզապիրենի քիմիական սահմանումը. ածխածին պարունակող օրգանական նյութ, որը մտնում է պոլիցիկլիկ ածխաջրածինների խմբի մեջ՝ 252,31 գ/մոլ մոլային զանգվածով:

    Ինչ է բենզապիրենը

    Բենզոպիրենը, ինչպես բոլոր PAH-ները, հիմնականում տեխնոլոգիական առաջընթացի արդյունք է՝ մարդու գործունեության հետևանք։ PAH-ների տեխնածին աղտոտման հիմնական աղբյուրները պինդ և հեղուկ օրգանական նյութերի, ներառյալ նավթի և նավթամթերքների, փայտի և մարդածին թափոնների այրումն են: Բենզապիրենի բնական աղբյուրներից հարկ է նշել անտառային հրդեհները, հրաբխային ժայթքումները։

    Այնուամենայնիվ, բենզապիրենի ձևավորումը կարող է առաջանալ նաև առանց այրման գործընթացների՝ պիրոլիզի, մխացող, պոլիմերացման ժամանակ։

    Բենզապիրենն արտազատվում է ծխելու ժամանակ. մեկ ծխախոտի ծխի մեջ բենզապիրենի պարունակությունը միջինում կազմում է 0,025 մկգ, ինչը շատ անգամ գերազանցում է MPC-ն (միջինը 10000-15000 անգամ): Հաշվարկվել է, որ մեկ սիգարետ ծխելը բենզապիրենի պարունակությամբ համարժեք է արտանետվող գազերի տասնվեց ժամ ինհալացիայի:

    Բենզոպիրենի բանաձև

    Բենզապիրենի երկու իզոմեր կա. Առաջինը 1,2-բենզապիրենն է (3,4-բենզպիրեն), որը պարունակվում է այրման բոլոր արտադրանքներում՝ յուղ, խեժ, ածուխ, տարբեր ծագման ծուխ, ներառյալ: Իր մաքուր տեսքով սրանք ասեղաձև բյուրեղներ կամ բաց դեղին գույնի թիթեղներ են, հալման ջերմաստիճանը մոտ 177 ° C է:

    4,5-Բենզոպիրեն - բյուրեղներ ասեղների և բաց դեղին գույնի թիթեղների տեսքով, 179 ° C հալման կետով: Պարունակվում է քարածխի խեժում, հանդիպում է հողերում (հատկապես ձեռնարկությունների և մայրուղիների մոտ)։ Այն չունի մուտագեն կամ քաղցկեղածին հատկություններ։

    Բենզոպիրենների քիմիական բանաձևը C20H12 է:

    Բենզոպիրեն հողում և օդում

    Բենզոպիրենը գործնականում չի առաջանում ազատ վիճակում, բայց միշտ նստում է օդում պարունակվող մասնիկների վրա։ Շարժվող օդային զանգվածների հետ բենզապիրենը տարածվում է մեծ տարածքի վրա և օդից դուրս ընկնելով պինդ մասնիկների հետ (օրինակ՝ տեղումների ժամանակ) մտնում է հողի շերտեր, ջրամբարներ և շենքերի մակերեսներ։

    Բենզապիրենի միգրացիայի և կուտակման գործում դեր է խաղում նաև այնպիսի աղբյուր, ինչպիսին ավտոմոբիլային տրանսպորտն է: Մի կողմից, երկար տարածություններով շարժվելով, մեքենաները նպաստում են բենզապիրենի միատեսակ բաշխմանը։ Մյուս կողմից, նստած բենզապիրենը մեծ քանակությամբ կուտակվում է մայրուղիների երկայնքով և դրանց կողքին գտնվող օբյեկտների վրա (այսպես կոչված «երկրորդական աղբյուրներ»):

    Բենզոպիրենը հեշտությամբ «ներառվում» է բնության մեջ նյութերի ցիկլում. տեղումների հետ, որը միշտ պարունակում է պինդ մասնիկներ, այն տեղափոխվում է նույնիսկ PAH-ների հիմնական աղբյուրից հեռու տարածքներ, մտնում ջրային մարմիններ, որտեղից գոլորշիացման գործընթացների ժամանակ բարձրանում է: կրկին օդում: Բենզապիրենը գաղթելու այս ունակությունն է հանգեցնում նրան, որ դրա պարունակությունը կարող է բարձր լինել այն վայրերում, որտեղ չկա այս նյութի հզոր աղբյուր:

    Մտնելով շրջակա միջավայր և կուտակվելով դրանում՝ բենզապիրենը ներթափանցում է բույսերի մեջ, որոնք հետագայում ծառայում են որպես անասունների կեր կամ օգտագործվում են մարդու սննդի մեջ։ Բույսերում բենզապիրենի կոնցենտրացիան ավելի բարձր է, քան դրա պարունակությունը հողում, իսկ սննդամթերքում (կամ կերերում) ավելի բարձր է, քան դրանց արտադրության համար նախատեսված հումքի մեջ: Քիմիական նյութերի, այդ թվում՝ բենզապիրենի կոնցենտրացիայի բարձրացման այս ազդեցությունը կոչվում է կենսակուտակում։

    Այսպիսով, բենզապիրենը վտանգավոր է ոչ միայն որպես շրջակա միջավայրի ֆոնային աղտոտում, այլ նաև որպես սննդային շղթայով օրգանիզմ թափանցող նյութ։

    Բենզապիրենի MAC

    Բենզապիրենի որոշման և վերահսկման հիմնական մեթոդը հեղուկ քրոմատոգրաֆիան է:

    Համաձայն 2.1.6.695-98 և 2.1.6.1338-03 հիգիենիկ ստանդարտների՝ օդում բենզապիրենի միջին օրական առավելագույն թույլատրելի քանակությունը (MPCds) 0,1 մկգ/100 մ3 կամ 10-9 գ/մ3 է, իսկ դրա MPC-ն՝ հողում։ համաձայն հիգիենիկ ստանդարտների 2.1. 7.2041-06 - 0.02 մգ / կգ ընդհանուր առմամբ, հաշվի առնելով ֆոնային մակարդակը: Օդում աշխատավայրերում միջին հերթափոխի MPC-ն 0,00015 մգ/մ3-ից ոչ ավելի է: (1-ին կետից և 2-րդ կետից. ԳՆ 2.2.5. 1313-03):

    Բենզապիրենի MPC-ն ջրում 0,000001 մգ/լ-ից ոչ ավելի է, կենտրոնացված ջրամատակարարման համակարգով խմելու ջրում՝ 0,000005 մգ/լ-ից ոչ ավելի: Շշալցված խմելու ջրի մեջ՝ 0,001 մկգ/լ-ից ոչ ավելի (ամենաբարձր որակի ջուր) մինչև 0,005 մկգ/լ՝ առաջին որակի շշալցված ջրում:

    Այն սննդամթերքներում, որոնցում բենզապիրենի առկայությունը թույլատրելի է տեխնոլոգիական առանձնահատկությունների պատճառով, բենզապիրենի թույլատրելի մակարդակը 0,001 մգ/կգ-ից ոչ ավելի է: Դրանք ներառում են. ապխտած խոզի ճարպ; երշիկեղեն և ապխտած արտադրանք թռչնի մսից և ենթամթերքից; ապխտած պահածոներ և ձկան պահածոներ, ապխտած ձուկ; սննդի հացահատիկ.

    Ծխի բուրավետիչներ օգտագործելիս բենզապիրենի պարունակությունը 2 մկգ/կգ (լ)-ից ոչ ավելի է, իսկ դրանց օգտագործումից հետո պատրաստի արտադրանքում բենզապիրենի պարունակությունը չպետք է գերազանցի 0,03 մկգ/կգ (լ):

    Այլ սննդամթերքներում բենզապիրենի առկայությունը չի թույլատրվում։

    Սակայն մոնիտորինգի արդյունքների համաձայն՝ բենզապիրենի պարունակության նորմերը բազմիցս գերազանցված են։ Միջին հաշվով, քաղաքներում օդի աղտոտվածության մակարդակը 5-12 անգամ բարձր է ՍԹԿ-ից, հողերում՝ 3-7 անգամ, սննդամթերքում՝ 1,5-ից 11 անգամ։

    Բենզապիրենի ազդեցությունը մարդու մարմնի վրա

    Բենզոպիրենը դասակարգվում է որպես առաջին վտանգի դասի նյութ: Վտանգի առաջին դասը շրջակա միջավայրի վրա չափազանց բարձր վտանգավոր ազդեցություն ունեցող նյութերն են, մինչդեռ դրանցից առաջացած փոփոխություններն անշրջելի են և չեն կարող վերականգնվել:

    Բենզոպիրենը ամենահզոր, բայց տարածված քաղցկեղածիններից մեկն է: Լինելով քիմիապես և ջերմային կայուն, օժտված լինելով կենսակուտակման հատկություններով, այն մտնելով և կուտակվելով մարմնում՝ գործում է անընդհատ և հզոր։ Բացի քաղցկեղածին լինելուց, բենզապիրենն ունի մուտագեն, սաղմնային և հեմատոտոքսիկ ազդեցություն։

    Բենզապիրենի օրգանիզմ ներթափանցելու ուղիները բազմազան են՝ սննդով և ջրով, մաշկով և ինհալացիայով։ Վտանգի աստիճանը կախված է նրանից, թե ինչպես է բենզապիրենը մտել օրգանիզմ։ Փորձերի ժամանակ, ինչպես նաև էկոլոգիապես անբարենպաստ տարածքների մոնիտորինգի համաձայն, բենզապիրենը ներմուծվում է ԴՆԹ համալիր՝ առաջացնելով անդառնալի մուտացիաներ, որոնք անցնում են հաջորդ սերունդներին: Հատկապես մտահոգիչ է բենզապիրենի կենսակուտակման փաստը. սերունդների հաջորդ սերունդներում մուտացիաների զարգացման հավանականությունը բազմիցս մեծանում է կենսակուտակման պատճառով:

    ՑԱՆԿԱՆՈՒՄ Ե՞Ք ԴՐԱՆՔ ԾԽԵԼՈՒՑ:


    Ապա միացե՛ք մեզ ծխախոտից հրաժարվելու մարաթոնին:
    Դա շատ ավելի հեշտ կդարձնի հրաժարվելը:

    4.1.2. Բենզո(ա)պիրենի զանգվածային մասնաբաժնի չափման մեթոդ սննդային հումքում, սննդամթերքում և հողում բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրմամբ

    Նպատակը և շրջանակը

    Մեթոդը նախատեսված է սննդային հումքի, սննդամթերքի և հողի մեջ բենզո(ա)պիրենի (BP) քանակական որոշման համար՝ աղյուսակում նշված դրա զանգվածային մասում: 1. Չափման միջակայքի ստորին սահմանը համապատասխանում է արտադրանքի և հումքի մեջ թույնի թույլատրելի մակարդակի (պարունակության) 1/2-ին, վերին սահմանին` թույլատրելիի հնգապատիկի չափով:

    Benz (a) pyrene-ը խիստ թունավոր քաղցկեղածին միացություն է, և դրա թույլատրելի պարունակությունը սննդամթերքի և սննդի հումքի մեջ սահմանված է սանիտարական կանոններով և SanPiN 2.3.2.560-96-ով:

    Տեխնիկան կարող է կիրառվել Ռուսաստանի Դաշնության Պետական ​​սանիտարահամաճարակային վերահսկողության հաստատությունների, այլ կազմակերպությունների և ձեռնարկությունների լաբորատորիաների կողմից, որոնք կապված են սննդամթերքի հետազոտության, քիմիական վերլուծության և սերտիֆիկացման հետ: Մեթոդաբանությունը արբիտրաժ չէ.

    Բրինձ. 11.14.

    • 1. Նաֆթալին 9. Քրայզեն (0.17*)
    • 2. Ացենաֆթեն (1.40*) 10. Բենզ(ա)պիրեն
    • 3. Ֆտորին (2.60*) 11. Բենզ(բ)ֆտորանտեն (0.26*)
    • 4. Ֆենանտրեն *2.40*) 12. Բենզ(c)ֆտորանտեն (0.10*)
    • 5. Անտրացին (0.13*) 13. Բենզ(ա)պիրեն (0.2*)
    • 6. Ֆտորանտեն (0.74*) 14. Դիբենց(ա,բ)անտրացին.
    • 7. Պիրեն (0.67*) 15. BeH3(g, h, i)nepHaen (0.21*)
    • 8. Բենց(ա)անտրացին (0.07*) 16. Ինդենո(1,2,3-cc1)պիրեն (0.26*)

    Վերլուծության պայմանները.

    Սյունակ՝ Supelcosil® LC RAS ​​(250 մմ x 2,1 մմ; 5 մկմ);

    Գրադիենտ՝ ացետոնիտրիլ (A) 50-100%, ջուր (B) 50-0%; 200 մկլ/րոպե Ջերմաստիճան՝ 25°C Նմուշի ծավալը՝ 10 μl Հայտնաբերում. սփյուռ, ըստ ծրագրի


    Չափման սխալի բնութագրերը

    BP-ի զանգվածային բաժնի (0,95 վստահության մակարդակով) չափման արդյունքի հարաբերական սխալի (±5) սահմանները նշված են Աղյուսակում: մեկ.

    Աղյուսակ 1.Վերլուծված օբյեկտները, չափումների միջակայքերը և բնութագրերը

    Ապրանքի խումբ (վերլուծված օբյեկտ)

    Թույլատրված բովանդակություն ( IV X),մգ/կգ

    BP զանգվածային մասի չափման միջակայք, մգ/կգ

    Գործակից

    արդյունահանում,

    Սխալների հարաբերական սահմաններ (±8), %

    Ապխտած միս, ձուկ և ճարպային մթերքներ

    Չափիչ գործիքներ, օժանդակ սարքեր, նյութեր և ռեակտիվներ

    Չափիչ գործիքներ

    Հեղուկ քրոմատոգրաֆներ.

    • - Միկրոսյուն «Milichrome-5», TU 25-7405.0009-89, տարբերակ 3 ֆտորաչափական (FlD) դետեկտորով (տարբերակ 1):
    • - Իզոկրատ կամ գրադիենտ հեղուկ քրոմատոգրաֆ, օրինակ՝ «Կպայեգ» (Գերմանիա), Ռուսաստանի Դաշնության 16848-97 չափիչ գործիքների պետական ​​ռեգիստր կամ «VEZHKh-3» քրոմատոգրաֆիկ հավելված, LLP «Lumex» (Սանկտ Պետերբուրգ), հագեցած. FLD «Fluorat-02 -2M», LLP «Lumex», Ռուսաստանի Դաշնության Չափիչ գործիքների պետական ​​ռեգիստր 14093-99 (տարբերակ 2):
    • - Իզոկրատ կամ գրադիենտ հեղուկ քրոմատոգրաֆ ցանկացած տեսակի PLD-ով, օրինակ «Kpaerg» (Գերմանիա), Ռուսաստանի Դաշնության Չափիչ գործիքների պետական ​​ռեգիստր 16848-97 (տարբերակ 3):

    Քրոմատոգրաֆիկ սյունակներ «Diasfer-110-S 16», TU 4215-001-05451931-94, CJSC «BioKhimMak ST» (Մոսկվա), քրոմատոգրաֆիկ համակարգի տարբերակին համապատասխանող ստանդարտ չափսերով.

    • - 2 x 80 մմ, dp = 5 - 7 մկմ (տարբերակ 1)
    • - 2 x 150 մմ, dp = 5 - 7 մկմ (տարբերակ 2)
    • - 4 x 150 մմ, dp = 5 - 7 մկմ (տարբերակ 3)

    Սարքաշարային և ծրագրային համալիր «MultiChrom-Spectrum», TU AZHRC

    3.036.001, ՓԲԸ Ampersend (Մոսկվա) կամ ցանկացած այլ ծրագրակազմ, որը թույլ է տալիս չափաբերել և քանակական որոշում արտաքին ստանդարտ մեթոդով:

    GSO 7515-98 բենզո(ա)պիրենի լուծույթի ացետոնիտրիլում բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայով 100 մկգ/սմ 3, AOZT «Ekros» (Սանկտ Պետերբուրգ).

    GSO 7064-93 բենզո(ա)պիրենի լուծույթի բաղադրությունը հեքսանում բենզո(ա)պիրենի զանգվածային կոնցենտրացիայով 100 մկգ/սմ 3, AOZT «Ekros» (Սանկտ Պետերբուրգ):

    Կշեռքներ լաբորատոր էլեկտրոնային 4 բջիջ. ճշգրտության մոդել VLE 134, ԳՕՍՏ 24104-88 կամ այլք:

    100 մկլ միկրոներարկիչներ Hamilton-ից, մոդել Microliter #1710 կամ համարժեք:

    Micropipettes 0.5; 0.2; 0,1 մկլ; ԳՕՍՏ 20292-74.

    Չափային բալոններ 2-25.2-50, 2-100 և 2-500, ԳՕՍՏ 1770-74.

    Ծավալային կոլբաներ 2-10-2, 2-100-2, ԳՕՍՏ 1770-74.

    Ավարտված պիպետներ 1, 2, 5, 10 սմ 3, ԳՕՍՏ 29227-91.

    Ռեակտիվներ և նյութեր

    Հեղուկ քրոմատագրման համար ացետոնիտրիլ, OP-3 բարձր մաքրություն, TU 6-09-14-2167-84, շտկված:

    Երկթորած ջուր, TU 6-09-2502-77.

    Հեքսան, քիմիապես մաքուր, TU 6-09-3375-78, չորացրած Na-ի վրա 2 Ս 04 , ուղղվել։

    Բենզոլ, քիմիապես մաքուր, ԳՕՍՏ 5955-75, չորացրած Na 2 Ս 04 , ուղղվել։

    Անջուր նատրիումի սուլֆատ, քիմիապես մաքուր, ԳՕՍՏ 4166-76.

    «Դիապակ» կոնցենտրացիոն փամփուշտներ՝ A-3, P-3, C; TU 4215-002-05451931-94, ZAO BioKhimMak ST (Մոսկվա):

    Օժանդակ սարքեր

    Էլյուենտների զտման և գազազերծման համակարգ ՓԲԸ «BioKhimMak ST» (Մոսկվա) կամ այլք:

    1,8 և 5,0 սմ 3 ապակե սրվակներ՝ տրամաչափման և անալիզի լուծույթների համար՝ պտուտակային գլխարկներով և տեֆլոնային միջադիրներով Supelco-ից, կատալոգի համարներ 2-6951, 2-7037 և

    2-7039 կամ համարժեք:

    Micromixer PPE-3, «Ekros» (Սանկտ Պետերբուրգ):

    Պտտվող գոլորշիչ IR-1M2, TU 25-1173.102-84 կամ այլք:

    25, 10 և 5 սմ 3 տարողությամբ խցաններով սուր հատակով կոլբաներ, ԳՕՍՏ 25336.

    Ազոտի հոսքի մեջ լուծույթները փչելու սարք, որը հագեցած է BioMark համատեղ ձեռնարկության (Լվով) կամ այլ ընկերության թերմոստատիկորեն կառավարվող ալյումինե բլոկով (չոր օդի բաղնիք):

    Մեմբրանային զտիչներ dp = 0,4-0,5 մկմ:

    Մոտ 7 մմ Hg վակուում ստեղծելու սարք։ Արվեստ. (ջրի շիթային պոմպ, ԳՕՍՏ 25336; Բեգեմոտ ջրի օղակաձև վակուումային պոմպ, UVK-RK2/1, ՓԲԸ BioKhimMak ST, Մոսկվա):

    Վակուումային նմուշի պատրաստման սարք (վակուումային կոլեկտոր) կամ այլ՝ առնվազն 10 սմ 3 հզորությամբ նմուշառիչներով:

    Buechner տափաշիշ, Bunsen ձագար, համապատասխանաբար առնվազն 500 և 200 սմ 3 տարողությամբ, ԳՕՍՏ 1770:

    100 և 500 սմ 3 տարողությամբ բաժանարար ձագար, ԳՕՍՏ 25336.

    Հարթ հատակով կոնաձև կոլբաներ՝ 50, 100 և 250 սմ3 տարողությամբ խցաններով, ԳՕՍՏ 25336.

    50 և 100 սմ 3 տարողությամբ խցաններով տանձաձև կոլբաներ, ԳՕՍՏ 25336.

    Կոնաձև ձագար առնվազն 10 սմ տրամագծով, ԳՕՍՏ 1770.

    Զտիչ թուղթ «կապույտ ժապավեն» տեսակի.

    Բամբակյա բուրդ բժշկական ոչ ստերիլ, բամբակյա։

    Չափման մեթոդ

    Տեխնիկան ներառում է հետևյալ հիմնական ընթացակարգերը.

    • - առաջնային արդյունահանում հեքսանով և ապխտած արտադրանքի նմուշից ացետոնիտրիլ BP-ի մեջ կրկին արդյունահանում.
    • - BP-ի առաջնային արդյունահանում ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդով հացահատիկի կամ հողի նմուշից.
    • - առաջնային էքստրակտի կոնցենտրացիան և մաքրումը պինդ փուլային արդյունահանման միջոցով.
    • - պատրաստված նմուշի քաղվածքի նոսրացում ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդով.
    • - քրոմատոգրաֆի չափորոշում ըստ BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի հայտնի արժեք ունեցող լուծույթների.
    • - պատրաստված նմուշի էքստրակտի լուծույթի վերլուծություն բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրմամբ (HPLC)՝ ֆլյուորեսցենտային ազդանշանի գրանցմամբ.
    • - որոշված ​​BP-ի նույնականացում պահպանման պարամետրերով.
    • - BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի հաշվարկը գրանցված անալիտիկ ազդանշանի և տրամաչափման բնութագրերի հիման վրա.
    • - BP-ի զանգվածային բաժնի հաշվարկ՝ հիմնվելով BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի, սննդի նմուշի զանգվածի և պատրաստված էքստրակտի լուծույթի ծավալի վրա.

    Անվտանգության պահանջներ

    Օգտագործված քիմիական միացությունների հետ աշխատելիս անհրաժեշտ է պահպանել թունավոր, կծու և դյուրավառ նյութերի հետ աշխատանքի համար սահմանված անվտանգության պահանջները, ԳՕՍՏ 12.1.018-86 և ԳՕՍՏ 12.1.004-76, հրդեհային անվտանգության պահանջները, ԳՕՍՏ 12.1.004- 76.

    Եթե ​​BP լուծույթները հայտնվում են մաշկի վրա կամ առարկաների մակերեսին, ապա դրանք պետք է մշակվեն ջրով և լվացող միջոցներով, այնուհետև էթիլային սպիրտով: Լուծույթները պետք է պահվեն սառնարանում փակ փաթեթավորմամբ:

    HPLC-ի համար համակարգը շահագործելիս և համապատասխան չափումներ կատարելիս անհրաժեշտ է պահպանել էլեկտրական անվտանգության կանոնները՝ ԳՕՍՏ.

    12.1.019-79 և սարքի շահագործման հրահանգները:

    Օպերատորի որակավորման պահանջներ

    Աշխատելու թույլատրված անձինք.

    • - որակավորում է որպես քիմիական ինժեներ կամ քիմիական տեխնիկ.
    • - Քիմիական լաբորատորիայում աշխատանքային փորձ ունենալը.
    • - ովքեր անցել են համապատասխան վերապատրաստման դասընթացներ և պրակտիկա լաբորատորիաներում, որոնք հավատարմագրված են HPLC-ով վերլուծություններ կատարելու համար.
    • - ստացել է դրական արդյունքներ վերահսկողական գործողությունների կատարման ընթացքում.

    Չափման պայմանները

    Նմուշի պատրաստումը, լուծույթների պատրաստումը, պատրաստումը և չափումները կատարվում են շրջակա միջավայրի ջերմաստիճանում 18-25 ° C, մթնոլորտային ճնշում 84,0-100,7 կՊա (630-800 մմ Hg), օդի խոնավությունը ոչ ավելի, քան 80% ( 25 °C ջերմաստիճանում):

    Լաբորատորիայում չափումներ կատարելիս պետք է պահպանվեն հետևյալ պայմանները՝ ցանցի լարումը 220 ± 10 Վ, ցանցի հաճախականությունը 50ժ 1 Հց։ Չափումները կատարվում են սարքի նկարագրությամբ և շահագործման հրահանգներով առաջարկվող պայմաններով:

    Պատրաստվում է չափումներ կատարել

    Ապակյա իրեր

    Հետագա օգտագործումից առաջ օգտագործված ապակյա սպասքը ողողվում է օգտագործված վերջին լուծիչով և մանրակրկիտ լվանում տաք ջրով ցանկացած լվացքի փոշիով, հաջորդաբար ողողում թորած և երկթորած ջրով և չորացնում: Մաքուր սպասքը պահվում է խցանով կամ բամբակյա շվաբրով փակելով:

    Նմուշառում, պահպանում և մշակում

    Նմուշառումը և միջինացումն իրականացվում է յուրաքանչյուր տեսակի արտադրանքի կարգավորող փաստաթղթերի համաձայն (ԳՕՍՏ 13586.3-83, ԳՕՍՏ 27668-88, ԳՕՍՏ 9792-73, ԳՕՍՏ 7631-85): Որոշված ​​BP-ն արդյունահանվում է ապխտած արտադրանքի նմուշներից չոր հեքսանով արդյունահանման միջոցով, որի գոլորշիացումից հետո այն կրկին արդյունահանվում է ացետոնիտրիլի մեջ: Հացահատիկի կամ հողի նմուշներից BP-ն հանելիս օգտագործվում է ջուր-ացետոնիտրիլի խառնուրդ (16:84): BP պարունակող առաջնային նմուշի էքստրակտի հետագա կոնցենտրացիան և մաքրումը, անկախ սկզբնական արտադրանքի բնույթից, իրականացվում է պինդ փուլային արդյունահանման համալիր սխեմայի համաձայն՝ օգտագործելով երեք խտացնող փամփուշտներ Diapak A-3, P-3, S: .

    Պատրաստի նմուշները (նմուշների էքստրակտները) լուծվում են ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդում (70:30):

    BP-ի զանգվածային բաժնի յուրաքանչյուր չափում ներառում է առնվազն երկու նմուշի պատրաստում և քրոմատոգրաֆիկ անալիզ:

    Լուծիչների խառնուրդների պատրաստում

    Լուծիչների խառնուրդները պատրաստվում են ծավալային մեթոդով աստիճանավոր բալոններում։ Ացետոնիտրիլի և ջրի պահանջվող ծավալները չափվում են առանձին աստիճանավոր բալոններով, այնուհետև խառնվում: Էքստրակտ Ա՝ ացետոնիտրիլ-ջուր (84:16):

    Էքստրակտորների պատրաստում

    Փոխադարձ հագեցված ացետոնիտրիլ և հեքսան պատրաստելու համար թափահարեք մոտ 300 սմ 3 ացետոնիտրիլ և 100 սմ 3 հեքսան 500 սմ 3 տարողությամբ բաժանարար ձագարի մեջ: Լուծիչների առանձնացումից հետո շերտերն առանձին են վերցվում՝ ստորին շերտը (ացետոնիտրիլ՝ հագեցած հեքսանով – արդյունահանող B) և վերին շերտը (ացետոնիտրիլով հագեցած հեքսան – էքստրակտ C), միջֆազը դուրս է մղվում։

    Էլյուենտների պատրաստում

    HPLC չափումների համար ացետոնիտրիլ-ջուր խառնուրդները պատրաստվում են հետևյալ հարաբերակցությամբ. Պատրաստի էլուենտները զտվում են թաղանթային ֆիլտրի միջոցով և իրականացվում է վակուումային կամ ջերմային գազազերծում:

    Կալիբրացիոն լուծույթների պատրաստում

    BP լուծույթի բաղադրության GSO-ն ացետոնիտրիլում (տես վերևում) օգտագործումից առաջ նոսրացնում են ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդով (7:3): Վերցված է պիպետ

    Պահեստային լուծույթի 1,0 սմ 3-ը դրվում է 100 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ և լուծիչը ավելացնում նշագծին: Այնուհետև ստացված լուծույթի որոշակի ծավալներ վերցնում են պիպետտով, տեղադրում 10 սմ 3 տարողությամբ ծավալային կոլբայի մեջ և լուծիչը ավելացնում նշագծին։ 2-5 (տարբերակ 1) և 3-7 (տարբերակ 2, 3) լուծույթների նոսրացման և կոնցենտրացիաների համար օգտագործվող լուծույթների համապատասխան ծավալները ներկայացված են Աղյուսակում: 2. BP լուծույթի բաղադրության GSO-ն հեքսանում օգտագործելիս (տես ստորև), ստորև բերված պայմաններում լուծիչը գոլորշիացնելուց հետո չոր մնացորդը վերալուծվում է ացետոնիտրիլում և նոսրացվում է վերը նկարագրվածի համաձայն՝ հաշվի առնելով հավաստագրվածի արժեքը։ GSO-ի կոնցենտրացիան.

    Աղյուսակ 2.Բենզոպիրենի (BP) վերլուծության մեջ տրամաչափման լուծումներ

    BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիան (GSO-ի հավաստագրված արժեք), մկգ/սմ 3

    Նախնական նոսրացման լուծույթ

    calibration

    BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիան, μg/cm3

    *Չի օգտագործվում քրոմատոգրաֆիկ համակարգի ուղղակի չափորոշման համար:

    Քրոմատոգրաֆիկ համակարգի պատրաստում

    Քրոմատոգրաֆը միացված է և պատրաստվում է շահագործման՝ համաձայն դրա նկարագրության և շահագործման ձեռնարկի: Տեղադրեք «Diasfer-110-C 16» սյունակը ստանդարտ չափսերով՝ համաձայն քրոմատոգրաֆի տարբերակի (տես վերևում): Ցետոնիտրիլի ամենաբարձր կոնցենտրացիան ունեցող էլուենտը մղվում է քրոմատոգրաֆիկ համակարգով, մինչև դետեկտորի բազային գիծը կայունացվի, այնուհետև այն պայմանավորվում է գրադիենտի սկզբնական պայմաններում՝ համաձայն «Վերլուծության պայմանների» համապատասխան բաժինների:

    Համակենտրոնացման փամփուշտների պատրաստում

    Համակենտրոնացման փամփուշտները Diapak A-3 և P-3 պատրաստվում են աշխատանքի հետևյալ կերպ.

    • 1. 3 սմ3 չոր Diapak A կամ P սորբենտ լցնում են 10 սմ 3 պոլիպրոպիլենային պատյան մեջ, որի ստորին հատվածում փոխարինվում է ֆիլտրը, որի վերին դատարկ հատվածը օգտագործվում է որպես ձագար՝ նմուշի կամ լուծիչի կիրառման համար:
    • 2. Փամփուշտը ուղղահայաց սեղմեք համապատասխան վակուումային սարքի մեջ և հպեք՝ սորբենտի հարթ, հորիզոնական վերին շերտ ստեղծելու համար: Diapak A-3 փամփուշտի վերջնական պատրաստման համար բավական է ներծծող շերտը ամրացնել փոքրիկ բամբակյա շվաբրով։
    • 3. Diapak P-3 քարթրիջը պատրաստելու համար սորբենտը հաջորդաբար լվանում են 10 սմ 3 բենզոլով, ացետոնով և. արդյունահանող Աթույլ վակուումով (կաթելային արագությունը ոչ ավելի, քան 1-2 կաթիլ վայրկյանում), կանխելով օդի մուտքը սորբենտ: Քարթրիջը ացետոնով լցնելուց հետո սորբենտին թույլ են տալիս նստել, ներմուծվում է վերին պոլիմերային ֆիլտրը, այն սեղմվում է սորբենտի վերին շերտի վրա և շարունակվում է լվացումը։ Հասնելով արդյունահանող Ամակարդակը ֆիլտրից 2-3 սմ բարձրության վրա, լվացումը դադարեցվում է, և քարթրիջը կնքվում է ներքևի խցանով և վերին ծածկով (պահման համար): Պատահական չորացման դեպքում քարթրիջը լվանում են արդյունահանող Ա.Նմուշը կիրառելուց առաջ խցանները հանվում են և թույլ վակուումով ջուր-ացետոնիտրիլ խառնուրդի մնացորդները տեղափոխվում են վերին ֆիլտրի մակարդակին, ապա անմիջապես լցնում են փորձարկման լուծույթը։ Diapak P-3 բազմակի օգտագործման քարթրիջի վերականգնումն իրականացվում է նմանատիպ սխեմայով, բացառելով վերին ֆիլտրի հեռացումը:

    Diapak C-ի կոնցենտրացիոն քարթրիջը աշխատանքի համար պատրաստվում է հետևյալ կերպ.

    • 1. Պատրաստի պոլիպրոպիլենային պարկուճը 1 սմ 3 Diapak S սորբենտով փակվում է խցաններով։ Խցանները հանելուց հետո քարթրիջը պատրաստվում է աշխատանքի՝ ներարկիչով դրա միջով 1-2 կաթիլ կաթիլային արագությամբ անցնելով 5 սմ 3 հեքսան։
    • 2. Նմուշը կիրառվում է ինքնահոս եղանակով` որպես ձագար օգտագործելով 10 սմ 3 ծավալով դատարկ պոլիպրոպիլենային մարմին, որը սերտորեն ամրացված է Diapak C պարկուճի վերին կցամասում:

    Նմուշի պատրաստում չափումների համար

    Բենզո(ա)պիրենի արդյունահանումը հեքսանով ապխտած արտադրանքի նմուշիցԱպխտած արտադրանքի նմուշի 10,0 գ նմուշը մանրացնում են 30 գ անջուր նատրիումի սուլֆատով հավանգի մեջ։ Խառնուրդը քանակապես տեղափոխվում է 100 սմ 3 հարթ հատակով կոլբայի մեջ և 40 սմ 3 հեքսանով արդյունահանվում է առնվազն 30 րոպե՝ խառնելով: Նմուշի ընդհանուր ճարպի առաջնային հեքսանային էքստրակտը թափվում է և 10 գ անջուր նատրիումի սուլֆատի միջով անցնում է մերկացնող կոլբայի մեջ: Կրկնեք արդյունահանման գործընթացը երկու անգամ երկու ծավալով 20 սմ 3 հեքսանով և քաղվածքի մի մասը անցկացրեք չորացուցիչի միջով նույն թորման կոլբայի մեջ: Գոլորշիացրեք հեքանը պտտվող գոլորշիչի վրա 35 ° C-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում, մինչև հոտը անհետանա:

    Ընդհանուր ճարպի քաղվածքը լուծվում է 20 սմ 3-ում արդյունահանող B,քանակապես տեղափոխել 50 սմ 3 տարողությամբ աստիճանավոր գլան և նույն լուծիչով լուծույթի ծավալը հասցնել 40,0 սմ 3:

    Ստացված լուծույթի 20,0 սմ 3-ը տեղափոխվում է 100 սմ 3 տարողությամբ տարանջատող ձագարի մեջ և BP-ն նորից արդյունահանվում է ացետոնիտրիլի մեջ՝ երեք ծավալով 20 սմ 3: արդյունահանող Բ.Ամեն անգամ, հասնելով փուլերի առավել ամբողջական տարանջատմանը, վերցվում է ստորին շերտը (BP-ի ացետոնիտրիլային էքստրակտ) և գոլորշիացվում պտտվող գոլորշիչի վրա 50-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում: °Cմինչև 10-15 սմ 3 ծավալ: Քանակականորեն (ացետոնիտրիլի միջոցով) լուծույթը տեղափոխում ենք 25 սմ 3 տարողությամբ չափիչ գլան, ացետոնիտրիլով ծավալը հասցնում 21,0 սմ 3, ավելացնում 4,0 սմ 3 բիթորած ջուր և ստացվածը մանրակրկիտ խառնում։ BP-ի ջրային-ացետոնիտրիլային քաղվածք:

    Բենզո(ա)պիրենի արդյունահանում հացահատիկի կամ հողի նմուշից ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդով

    Նմուշի 10-25 գ-ի մի մասը տեղափոխում են հարթ հատակով կոլբայի մեջ, ավելացնում 50-125 սմ 3: արդյունահանող Ա,խստորեն պահպանելով արտադրանքի նմուշի 1:5 հարաբերակցությունը արդյունահանողի ծավալին և խառնել 1 ժամ: ֆիլտրացված BP-ի ջրային-ացետոնիտրիլային քաղվածքվակուումի տակ գտնվող Buchner ձագարի վրա թղթե ֆիլտրի միջով և քամեք ֆիլտրի վրայի նստվածքը:

    Հացահատիկի կամ ապխտած արտադրանքի առաջնային մզվածքի նախնական մաքրում և խտացում

    Փամփուշտի միջով անցեք Diapak A-3 25.0 սմ 3 իսկ հետո 3 սմ 3 արդյունահանող Ա 2-3 կաթիլ վայրկյանում կաթիլային արագությամբ ընդունող կոլբայի մեջ:

    Հավաքված լուծույթն անցնում է պատրաստված քարթրիջով Diapak P-3, իսկ հետո 5 սմ 3 ացետոնիտրիլ՝ վայրկյանում 1-2 կաթիլ կաթիլային արագությամբ՝ դեն նետելով արտահոսքերը: BP պարունակող թիրախային մասնիկը քարթրիջից զտվում է բենզոլ-ացետոնիտրիլ (1:1) խառնուրդով 7 սմ 3 ծավալով վայրկյանում 1-2 կաթիլ կաթիլային արագությամբ թորման կոլբայի մեջ: Էլուատը գոլորշիացվում է պտտվող գոլորշիչի վրա 50 °C-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում, կոլբայի մեջ ավելացվում է 0,5 սմ 3 հեքսան և մանրակրկիտ թափահարում միկրոխառնիչի վրա, մինչև չոր մնացորդն ամբողջությամբ լուծարվի:

    Հողի առաջնային քաղվածքի նախնական մաքրում և կոնցենտրացիան

    Անցեք փամփուշտի միջով Diapak A-3 5.0 սմ 3 BP-ի ջրային-ացետոնիտրիլային էքստրակտ,ապա 3 սմ 3 արդյունահանող Ա 2-3 կաթիլ վայրկյանում կաթիլային արագությամբ ընդունող կոլբայի մեջ: Էլուատը տեղափոխեք 25 սմ 3 տարողությամբ աստիճանավոր գլան, ողողեք կոլբը 5 սմ 3 երկու ծավալով: արդյունահանող Աեւ լուծույթի ծավալը գլանում հասցնել 20 սմ 3:

    5,0 սմ 3 նոսրացված լուծույթն անցնում է պատրաստված քարթրիջով Diapak P-3, իսկ հետո 5 սմ 3 ացետոնիտրիլ կաթիլային արագությամբ վայրկյանում 1-2 կաթիլ՝ դեն նետելով լվացումները: BP պարունակող թիրախային մասնիկը քարթրիջից զտվում է բենզոլ-ացետոնիտրիլ (1:1) խառնուրդով 7 սմ 3 ծավալով վայրկյանում 1-2 կաթիլ կաթիլային արագությամբ թորման կոլբայի մեջ: Էլուատը գոլորշիացվում է պտտվող գոլորշիչի վրա 50 °C-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում, կոլբայի մեջ ավելացվում է 0,5 սմ 3 հեքսան և մանրակրկիտ թափահարում միկրոխառնիչի վրա, մինչև չոր մնացորդն ամբողջությամբ լուծարվի:

    Քաղվածքի նուրբ մաքրում

    Նմուշի լուծույթի 0,5 սմ 3 հեքսանով քսվում է պատրաստված Diapak C քարթրիջի վրա ինքնահոս, այնուհետև կոլբը լվանում են 0,5 սմ 3 հեքսանի երկու բաժիններով և հաջորդաբար քսում քարթրիջի վրա՝ դեն նետելով բոլոր լվացումները: BP-ն 2,0 սմ 3 ծավալով բենզոլով զտվում է վայրկյանում 1-2 կաթիլ արագությամբ և գոլորշիացվում է պտտվող գոլորշիչի վրա 50 °C-ից ոչ ավելի ջերմաստիճանում: BP նմուշի էքստրակտի չոր մնացորդը լուծեք ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդում (7:3), որի ծավալները նշված են «Չափման պայմաններ» բաժնում քրոմատոգրաֆիկ համակարգի յուրաքանչյուր տարբերակի համար (տես ստորև):

    Ավարտական ​​և չափումներ

    Քրոմատոգրաֆի չափորոշում

    Քրոմատոգրաֆը չափորոշվում է տրամաչափման լուծույթների անվանական ծավալի (Աղյուսակ 2) հաջորդական մուտքագրմամբ (BP չափման պայմաններում)՝ դրանց զանգվածային կոնցենտրացիաների աճման կարգով: Յուրաքանչյուր լուծույթ ներարկվում է քրոմատոգրաֆի մեջ առնվազն երկու անգամ: Քրոմատոգրաֆիկ համակարգի ճիշտ կարգավորմամբ, նվազագույն կոնցենտրացիայով տրամաչափման լուծույթի քրոմատոգրամի վրա գագաթնակետի բարձրությունը պետք է գերազանցի բազային աղմուկի մակարդակը առնվազն 10 անգամ:

    Քրոմատոգրամների մաթեմատիկական մշակումից հետո ամրագրվում են պահպանման պարամետրերը և գագաթնակետային տարածքները և կառուցվում են տրամաչափման բնութագրերը (GC), որոնք արտացոլում են գագաթնակետի տարածքի միջին արժեքի կախվածությունը տրամաչափման լուծույթում BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայից:

    Վերահսկել տրամաչափման բնութագրերի կառուցման ճիշտությունը:

    Կալիբրացիոն բնութագիրը վերակառուցվում է սյուները փոխելիս, սպասարկում և կանխարգելիչ սպասարկում իրականացնելուց հետո, GC-ի կայունության մոնիտորինգի բացասական արդյունքներով (տես ստորև):

    Բենզո(ա)պիրենի որոշում

    Չափման պայմաններ (տարբերակ 1)

    Վերլուծության համար BP նմուշի պատրաստված էքստրակտը լուծվում է 0,1 սմ 3 ացետոնիտրիլ-ջուր խառնուրդի մեջ:

    FMD-ի և UVPA-ի աշխատանքի ռեժիմները սահմանվում են համակարգչի ստեղնաշարից՝ համաձայն Օգտագործողի ձեռնարկի (HSS «MultiChrome-Spectrum») և վերահսկվում են մոնիտորների վրա հետևյալ ձևով.

    Ֆլյուորոմետրիկ դետեկտոր

    • գրգռման ալիքի երկարությունը 296 նմ;
    • արտանետման ալիքի երկարությունը - լույսի ֆիլտր թիվ 2 (ավելի քան 380 նմ);
    • չափման ժամանակը 0,2 վրկ.

    Ավտոմատ դիսպենսեր

    • վերածնում ծավալը 0.4 սմ 3;
    • նմուշի ծավալը 0.04 սմ 3;
    • հոսքի արագություն 0.15 սմ 3 / րոպե;
    • հավաքագրման արագությունը 0,3 սմ 3 / րոպե;
    • BP-ի պահպանման ժամանակը 11 րոպե:
    • Անոթներում էլուենտների բաղադրությունը և ացետոնիտրիլային գրադիենտի կազմման սխեման ներկայացված են Աղյուսակում: 3.

    Աղյուսակ 3էլուենտներ

    Չափման պայմաններ (տարբերակ 2)

    Վերլուծության համար պատրաստված (տես վերևում) BP նմուշի էքստրակտը լուծվում է 0,5 սմ 3 ացետոնիտրիլ-ջուր խառնուրդի մեջ:

    • ֆիլտր հուզման գծի վրա - «X4»;
    • ֆիլտր արտանետման գծի վրա - «KhZ»;
    • նմուշի ծավալը 0.02 սմ 3;
    • զգայունությունը միջին է;
    • հարթեցում - 4;
    • «ֆոնային» մակարդակն ընտրվում է թիվ 3 տրամաչափման լուծույթի փորձնական քրոմատոգրամի գրանցման արդյունքների հիման վրա։
    • հոսքի արագություն 0.2 սմ 3 / րոպե;
    • էլուենտ 84;
    • BP-ի պահպանման ժամանակը մոտ 12 րոպե է:

    Գրադիենտ բաժանման ռեժիմ.

    • հոսքի արագություն 0.25 սմ 3 / րոպե;
    • eluent 100 eluent 70-ում 20 րոպեում;

    Չափման պայմաններ (տարբերակ 3)

    Վերլուծության համար BP նմուշի պատրաստված էքստրակտը լուծվում է 0,5 սմ 3 ացետոնիտրիլ-ջուր խառնուրդի մեջ:

    • գրգռման ալիքի երկարությունը 375 նմ;
    • արտանետման ալիքի երկարությունը 405 նմ;
    • հոսքի արագություն 0.8 սմ 3 / րոպե;
    • նմուշի ծավալը 0.02 սմ 3;
    • ժամանակի հաստատուն 1.0 վրկ.

    Իզոկրատական ​​տարանջատման ռեժիմ.

    • էլուենտ 84;
    • BP-ի պահպանման ժամանակը մոտ 12 րոպե է;

    Գրադիենտ բաժանման ռեժիմ.

    • գծային գրադիենտ 30-ից 70% eluent 100 eluent 70-ում 20 րոպեում;
    • BP-ի պահպանման ժամանակը մոտ 14 րոպե է:

    Քրոմատոգրամների ձեռքբերում և մշակում

    Նմուշի էքստրակտային լուծույթը երկու անգամ ներմուծվում է քրոմատոգրաֆ: BP-ի նույնականացումը կատարվում է նմուշի էքստրակտի և տրամաչափման լուծույթների քրոմատոգրամներում պիկ պահպանման պարամետրերի համեմատության հիման վրա: Պահպանման մոտավոր պարամետրերը նշված են «Չափման պայմաններ» բաժիններում: Վերլուծված միացության հուսալի նույնականացումը համապատասխանում է տրամաչափման լուծույթի և նմուշի պահպանման պարամետրերի արժեքների տարբերությանը, որը չի գերազանցում 0,2 րոպեն:

    Քաղվածքի լուծույթի նոսրացում

    Իրականացվում է այն դեպքում, երբ որոշված ​​BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիան գերազանցում է իր առավելագույն զանգվածային կոնցենտրացիան չափաբերման լուծույթներում: Էքստրակտային լուծույթը նոսրացնում են երկու անգամ (նոսրացման հարաբերակցությունը, զիլ = 2)՝ վերցնելով այս լուծույթի հավասար ծավալների և ացետոնիտրիլ-ջրի խառնուրդը (70։30) և խառնելով վերջինս։ Այն դեպքում, երբ մեկ նոսրացումը չի վերացնում «անջատված սանդղակը», ընթացակարգը կրկնվում է (նոսրացման աստիճանը, dil = 4):

    Չափումների արդյունքների մշակում

    Հաշվարկեք գագաթնակետային տարածքի միջին արժեքը (քրոմատոգրաֆի ելք) նմուշի քաղվածքի լուծույթի երկու ներարկումների համար քրոմատոգրաֆ: Վերահսկել ելքային ազդանշանների կոնվերգենցիան (տես ստորև):

    Ըստ տրամաչափման կախվածության՝ լուծույթում հայտնաբերվում է BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի արժեքը՝ համապատասխան գագաթնակետի տարածքի միջին արժեքին։

    BP-ի զանգվածային բաժինը (I^), մգ/կգ, i-րդ նմուշում (որոշման արդյունքը) հաշվարկվում է բանաձևով.

    որտեղ Cbp-ն անալիտի զանգվածային կոնցենտրացիան է BP-ի i-րդ նմուշի էքստրակտի լուծույթում, μg/cm 3 (հաշվարկվում է ըստ տրամաչափման կախվածության՝ ելնելով գագաթնակետի տարածքի միջին արժեքից). Vp- BP-ի /-րդ նմուշի քաղվածքի լուծույթի ծավալը, սմ 3; Ռ- BP-ի արդյունահանման աստիճանը նմուշի պատրաստման փուլում՝ համաձայն աղյուսակի: 2; Մ հավասար- նմուշի այն մասի զանգվածը, որը համապատասխանում է BP-ի ջրային-ացետոնիտրիլային էքստրակտին, որն օգտագործվում է մաքրման և հետագա քրոմատոգրաֆիկ որոշման համար, - նմուշի համարժեք զանգված, որը կազմում է 5,0 գ (հատիկ, ապխտած արտադրանք) կամ 0,25 գ (հող):

    Էքստրակտի նոսրացման դեպքում (տես վերևում) BP-ի զանգվածային բաժինը ( W,-,մգ/կգ) /-րդ չափում հաշվարկվում է բանաձևով

    որտեղ wj- բանաձևով ստացված արժեքը (II. 1), dil - նոսրացման աստիճանը (տես վերևում):

    Հաշվարկել BP-ի զանգվածային բաժնի միջին արժեքը երկու նմուշի համար (վերլուծության արդյունք).

    Վերահսկել BP-ի զանգվածային բաժնի որոշման արդյունքների կոնվերգենցիան (տես ստորև):

    Չափումների արդյունքների գրանցում

    Որոշվող օբյեկտում BP-ի զանգվածային բաժնի վերլուծության (չափման) արդյունքը ներկայացված է ձևով.

    որտեղ W- BP-ի զանգվածային բաժինը՝ հաշվարկված բանաձևով (II.3).

    Եթե ​​BP-ն չի հայտնաբերվել, ապա չափման արդյունքը ներկայացվում է ձևով

    որտեղ P «ds-ը BP-ի թույլատրելի պարունակությունն է՝ համաձայն Աղյուսակ 1-ի:

    MVI սխալի վերահսկում

    Քրոմատոգրաֆի ելքային ազդանշանների կոնվերգենցիայի կառավարում

    Վերահսկումն իրականացվում է յուրաքանչյուր նմուշի տրամաչափման և վերլուծության ժամանակ՝ կապված քրոմատոգրաֆում լուծույթի երկու ներարկումներով ստացված ելքային ազդանշանների հետ (Քրոմատոգրամների վրա BP-ի գագաթնակետերի տարածքների արժեքները): Վերահսկողության արդյունքը համարվում է բավարար, եթե ելքային ազդանշանների միջակայքը, որը վերաբերում է միջին թվաբանականին, չի գերազանցում 8%-ը:

    Կալիբրացիոն բնութագրի կառուցման ճշգրտության վերահսկում

    Վերահսկումն իրականացվում է յուրաքանչյուր չափաբերման ժամանակ: Վերահսկողության արդյունքը ճանաչվում է բավարար, եթե պայմանները

    որտեղ sj- BP-ի գագաթնակետային տարածքի միջին արժեքը y «րդ չափաբերման լուծույթի համար, c.u.; Ս)- y "-րդ չափաբերման լուծույթում BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի չափորոշիչին համապատասխանող գագաթնակետային տարածքի արժեքը, c.u.

    Կալիբրացիոն բնութագրի կայունության վերահսկում

    Վերահսկողությունն իրականացվում է ամեն օր՝ վերլուծված նմուշների հետ աշխատանքը սկսելուց առաջ՝ օգտագործելով հսկիչ լուծույթ, որն օգտագործվում է որպես վերլուծվող օբյեկտում դրա թույլատրելի պարունակությանը համապատասխանող BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայով տրամաչափման լուծույթ:

    Վերահսկողության արդյունքը ճանաչվում է բավարար, եթե պայմանը բավարարված է

    որտեղ C ki - հսկիչ լուծույթում BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի արժեքը, որը հայտնաբերված է գագաթնակետի տարածքի միջին արժեքի համար տրամաչափման բնութագրիչով, μg/cm 3; With to - BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիայի արժեքը հսկիչ լուծույթում ըստ աղյուսակի: 2.

    Որոշման արդյունքների կոնվերգենցիայի վերահսկում

    Վերահսկումն իրականացվում է յուրաքանչյուր վերլուծության (չափման) ժամանակ: Վերահսկողության արդյունքը համարվում է բավարար, եթե միջին թվաբանականին (վերլուծության արդյունք) որոշումների արդյունքների միջակայքը չի գերազանցում 10%-ը։

    Սխալների վերահսկում հավելումների մեթոդով

    Վերահսկողությունն իրականացվում է.

    • ա) մինչև սույն MVI-ի կիրառման մեկնարկը` առանց ձախողման.
    • բ) երբ հայտնվում են BP-ի զանգվածային բաժնի որոշման կասկածելի արդյունքներ.
    • գ) ներլաբորատոր հսկողության պլաններին համապատասխան.
    • դ) լաբորատորիայի գործունեությունը վերահսկող կազմակերպությունների պահանջով:

    Հավելումը ձևավորվում է տրամաչափման լուծույթի հիման վրա: Հավելյալ արժեք (Դ,մգ/կգ) ընտրվում է այնպես, որ նմուշում BP-ի զանգվածային բաժինն ավելանա 1,5-2,5 անգամ: Հաշվարկն իրականացվում է ըստ բանաձևի

    որտեղ Գ Դ- BP-ի զանգվածային կոնցենտրացիան տրամաչափման լուծույթում, μg/cm 3; Վո- նմուշի մեջ ներմուծված BP տրամաչափման լուծույթի ծավալը, սմ3; M fw- անալիզի համար վերցված նմուշի համարժեք քաշը, է.

    Հավելումը ներմուծվում է հացահատիկի կամ հողի նմուշի առաջնային էքստրակտի մեջ՝ աղյուսակին համապատասխան պատրաստված տրամաչափման լուծույթի տեսքով: 2. Հավելումը ներմուծվում է ապխտած արտադրանքի առաջնային մզվածքի մեջ՝ հեքսանում համանման կոնցենտրացիայի լուծույթի տեսքով: Դա անելու համար BP-ի բաղադրության GRM-ը հեքանում (տես վերևում) նոսրացվում է (հաշվի առնելով հավաստագրված կոնցենտրացիայի արժեքի ուղղումը) տրամաչափման լուծույթների պատրաստման կարգի համաձայն (տես վերևում), օգտագործելով հեքանը որպես լուծիչ և անհրաժեշտ կոնցենտրացիայի լուծույթ ստանալը. Երբ լուծիչի գոլորշիացումից հետո BP-ի GSO բաղադրությունն օգտագործվում է ացետոնիտրիլում, չոր մնացորդը նորից լուծվում է հեքսանում և նոսրացվում է հեքսանով, ինչպես նկարագրված է վերևում:

    BP-ի բնական պարունակությամբ երկու նմուշների և BP-ի ավելացմամբ երկու նմուշների անալիզը կատարվում է նույն պայմաններում (մեկ գործիք, մեկ տրամաչափման բնութագրիչ, մեկ օպերատոր): Վերահսկողության արդյունքը ճանաչվում է բավարար, եթե պայմանը բավարարված է

    որտեղ Վ Դ- BP-ի զանգվածային բաժինը հավելումով նմուշներում, մգ/կգ; Վ- BP-ի զանգվածային բաժինը նմուշներում առանց հավելումների, մգ/կգ ( Վ ԴԵվ W-զանգվածային բաժնի միջին արժեքները երկու նմուշների համար՝ կոնվերգենցիայի վերահսկման դրական արդյունքներով):

    Գործնական էկովերլուծության մեջ այս տեխնիկայի կիրառման օրինակը կարող է ծառայել որպես քրոմատոգրամ և տրամաչափման գրաֆիկ՝ սննդամթերքում բենզո(ա)պիրենի որոշման համար (Նկարներ 11.15 և 11.16):

    Օբյեկտներում բենզո(ա)պիրենի որոշման սխալի վերահսկման արդյունքները ֆտորաչափական հայտնաբերմամբ հավելումների մեթոդով 375 Ex/405 Et (տարբերակ 3).

    Հավելումների մակարդակը համապատասխանում է բենզապիրենի թույլատրելի պարունակության 0,5-ին (0,0005 մգ/կգ՝ հացահատիկ և ապխտած մթերք, 0,01 մգ/կգ՝ հող):


    Բրինձ. 11.15.

    Ավարտում բաղադրիչի համար՝ BaP Հարաբերակցության գործակից՝ 0,999667 Պատասխան՝ Տարածք

    Հղման ալիք 365 Ex/405 Em

    Բանաձև Y = Ki X

    Արժեքները 100 ( Վ Դ - W-D) / D 1-ին և 2-րդ նմուշների համար կազմում են համապատասխանաբար 10 և 16%: Որոշված ​​միացությունը ցորենի ալյուրի սկզբնական նմուշում առկա է 0,00009 կգ/կգ չափով։

    Նմուշ 1 - 0,00064 մգ/կգ Նմուշ 2 - 0,00067 մգ/կգ

    • Ընդհանուր դեպքում, տրամաչափման բնութագիրը ունի S = AC + B ձևը, որտեղ S-ը գագաթնակետային տարածքն է, c.u.; C-ն աղտոտիչի զանգվածային կոնցենտրացիան է, μg/cm3; A-ն և B-ն գործակիցներ են: