Médium agarovej kultúry alkalické na izoláciu Vibrio cholerae. Klasifikácia kultivačného média Alkalický agar na izoláciu Vibrio cholerae

04.07.2021

CAMP krvný agar... Do 2% výživného agaru, pH 7,4 - 7,6, sa pridá 0,2% glukózy a erytrocytov z oviec alebo dobytka. Erytrocyty z citrátovej krvi sa trikrát premyjú izotonickým roztokom chloridu sodného, aby sa odstránil antihemolyzín, ktorý môže byť obsiahnutý v sére, potom sa resuspendujú v rovnakom roztoku na pôvodný objem krvi. K agaru sa pridá 5% suspenzia erytrocytov.

Žlč - alkalický agar (ďalej len HA). Suchý výživný agar - 35,0 g; kvasnicový autolyzát - 20,0 ml; glukóza - 10,0 g; destilovaná voda - 600 ml. Agar sa rozpustí, prefiltruje sa a pridá sa 400,0 ml čerstvej hovädzej žlče a 5,0 g uhličitanu sodného.

Pripravené médium sa sterilizuje autoklávovaním pri teplote 112 ° C počas 15 minút. Pred naliatím do pohárov sa do média pridá 50,0 ml čerstvej krvi (baran, králik alebo človek), 12,5 ml 0,01% roztoku kryštalickej fialovej a 20 ml roztoku hydroxidu draselného (ďalej len KOH).

Mlieko s metylénovou modrou.Čerstvé mlieko sa privedie k varu, nechá sa jeden deň, zbaví sa smotany, znova sa povarí, znovu sa nechá jeden deň a vrchná vrstva sa znova odstráni. Takto odstredené mlieko sa prefiltruje cez silnú vrstvu vaty alkalizovanej 10% roztokom uhličitanu sodného na pH 7,2. K 100 ml mlieka sa pridajú 2,0 ml 1% vodného roztoku metylénovej modrej. Takto pripravené médium sa naleje do sterilných skúmaviek, 5,0 ml, a sterilizuje sa prúdom pary 3 dni počas 30 minút.

Enterokokové diferenciálne diagnostické prostredie (EDDS). Suchý výživný agar - 35 g, kvasnicový autolyzát na prípravu živného média - 20 ml, glukóza - 10 g, destilovaná voda - 800 ml. Roztopí sa, zahreje sa, prefiltruje sa a sterilizuje sa v autokláve počas 15 minút pri teplote 112 ° C, pH 7,2 - 7,4.

Pred nalievaním do pohárov sa do živného média pridá TTX - 0,1 g; vodný roztok kryštalickej fialovej 0,01% - 12,5 ml; kyselina nalidixová - 0,1 g; sterilné odstredené mlieko zohriate na 44-45 ° C - 200 ml; čerstvá defibrinovaná krv (zvieratá alebo ľudia) - 50 ml. Obsah sa dôkladne premieša a naleje do 7 ml pohárov.

Výživný agar s cukrovými kvasnicami s teluritom draselným. Suchý výživný agar - 35 g, kvasnicový autolyzát - 20 ml, glukóza - 10 g, destilovaná voda - 1000 ml. Pripravená zmes sa roztaví zahrievaním, pridá sa citrát sodný - 5,0 g a médium sa sterilizuje pri teplote 112 ° C. C po dobu 15 minút, pH 7,2-7,4. Pred naliatím média do sterilných misiek pridajte 50 ml konského séra, 0,1 g kyseliny nalidixovej a 0,7 g (35 ml 2% vodného roztoku) teluritu draselného, dôkladne premiešajte.

Výživný vývar s glukózou. 0,2 g glukózy sa pridá k 100 ml výživného média, pH 7,2-7,4.

Pripravené médium sa sterilizuje frakčne 3 dni za sebou po dobu 20 minút alebo raz po dobu 15 minút pri 0,5 atm. v autokláve.

5% krvný agar. Na 100 ml 2% živného agaru sa rozpustí a ochladí na 45 stupňov. С, pH 7,4-7,6, pri dodržaní pravidiel asepsy, pridajte 5 ml defibrinovanej jahňacej, konskej alebo králičej krvi. Zmes sa dôkladne premieša, naleje do pohárov s vrstvou 3-4 mm.

Podobné informácie:

III. Faktory mikroprostredia odvetvia cestovného ruchu vo Voronežskej oblasti
Správna a právna úprava ochrany životného prostredia. Správne a právne postavenie orgánov životného prostredia

Popis 10733-00005

Stredne alkalický popis agarovej kultúry

Alkalické agarové kultivačné médium- husté živné médium na izoláciu Vibrio cholerae.
Kvalitné zloženie, celkom výživné a podporuje rýchlu tvorbu vibrio kolónií, zatiaľ čo pyrosulfit sodný čiastočne potláča sprievodnú mikroflóru.
Zvýšená hodnota pH je selektívnym faktorom, ktorý nakoniec potláča vývoj cudzích mikroorganizmov a neovplyvňuje rast patogénu cholery.

Stredne zásadité technické vlastnosti agarovej kultúry

Zvýšená hodnota pH je selektívnym faktorom, ktorý nakoniec potláča vývoj cudzích mikroorganizmov a neovplyvňuje rast patogénu cholery.
Kultivácia sa uskutočňuje pri 37 ° C po dobu 12-14 hodín.

Zloženie alkalického agaru :
Pankreatický hydrolyzát z rybej múčky, peptónový suchý fermentát, kvasnicový extrakt, glukóza, disubstituovaný fosforečnan sodný, chlorid sodný, metabisulfit sodný, uhličitan sodný, agar.

Príprava alkalického agaru:
Liečivo v množstve potrebnom na prípravu konkrétnej série živného média sa zmieša s 1 litrom destilovanej vody, varí sa až do úplného roztopenia agaru, prefiltruje sa cez filter z bavlnenej gázy, naleje sa do liekoviek a sterilizuje sa v autokláve.
(121 ± 1) ° C.
Hotové živné médium, priehľadné, žlté. Ľahká opalescencia je povolená.
pH 8,0 ± 0,2
Hotové médium je možné skladovať 10 - 14 dní pri teplote 2 - 8 ° C, chránené pred svetlom.

V tejto časti " VÝŽIVOVÉ MÉDIÁ»Môžete si objednať a kúpiť. Ak chcete zvoliť iný model z kategórie « VÝŽIVOVÉ MÉDIÁ»Musíte ísť do hlavnej ponuky alebo pomocou odkazov v dolnej časti stránky. Ak sú v našej databáze pokyny Médium agarovej kultúry alkalické na izoláciu Vibrio cholerae.
Na tejto stránke nájdete odkaz na stiahnutie pokynu, pasu alebo iného technického dokumentu. Ak výrobok má „Médium agarovej kultúry alkalické na izoláciu Vibrio cholerae“ cena nie je nijaká, potom ju môžete kedykoľvek skontrolovať u našich manažérov zaslaním žiadosti alebo kontaktovaním našich telefónnych čísel uvedených v hornej časti stránky.
Snažíme sa zachovať aktuálnu zostavu populárnych modelov.
Dostupnosť a dodacia lehota komoditnej položky Médium agarovej kultúry alkalické na izoláciu Vibrio cholerae prosím o vysvetlenie, prosím o objasnenie.

Na všetky typy zariadení predávaných spoločnosťou „Himtest Ukraine +“ sa poskytuje záruka, ktorej doba sa môže pohybovať od 1 mesiaca do 5 rokov (v závislosti od typu produktu a výrobcu).

Spoločnosť "Khimtest Ukraine +" tiež vykonáva pozáručnú opravu domácich laboratórnych prístrojov, údržbu laboratórnych prístrojov, modernizáciu (elektronizáciu) chromatografov a testovacích strojov na zisťovanie mechanických vlastností materiálov.

Obnovíme pracovnú kapacitu za rozumnú cenu:

merače vlhkosti;
Analyzátory plynov na báze oxidu uhoľnatého paládia;
analyzátory ortuti "Julia";
rokla s váhami;
vzorkovače vzduchu;
plynové chromatografy;
kvapalinové chromatografy;
generátory vodíka;
fotokolorimetre KFK;
vážiace zariadenie;
Ph-metre a ionoméry;
sušiace skrinky a muflové pece;
merače hluku a vibrácií;
liehovarníci a pod.

Zoznam dokumentácie k zariadeniu:

Návod na obsluhu
Inštalačné pokyny
Pokyny na inštaláciu a údržbu
Návod na inštaláciu a obsluhu
Pokyn na prispôsobenie
Pokyny na údržbu a opravy
Príručka k výcviku
Používateľská a servisná príručka
Pokyny na opravu (schéma zapojenia)
Pokyny na údržbu
Inštalačná príručka
Návod na obsluhu a inštaláciu
Návod na obsluhu a údržbu
Návod na obsluhu
Metóda overovania
Elektrická schéma
Používateľská príručka
Pokyny na opravu
Katalóg (prvky, náhradné diely atď.)
Skúšobný postup
Metóda ladenia
Metóda výpočtu
Metodické materiály
Pas
Softvér
Odporúčania na opravu
Sprievodca správcom
Návod na obsluhu
Ručná manipulácia
Inštalačná príručka
Inštalačná a údržbová príručka
Používateľský manuál
Návod na použitie
Referenčná príručka
Technická dokumentácia / príručka
Technické podmienky
technické údaje
Technický popis
Návod na použitie
Prevádzková a servisná dokumentácia.

Dodávku váh, analytických, lekárskych a laboratórnych prístrojov a nástrojov, ako aj laboratórneho chemického skla, laboratórneho, lekárskeho a kancelárskeho nábytku realizuje logistická spoločnosť „Nová pošta“ alebo doručovacie služby podľa vášho výberu ( „Doručenie“, „Autolux“, „Nočný expres“, „Gunsel“, „Euro-Express“ a pod.).

Pobočky "Nová pošta" sú takmer v každej osade na Ukrajine. Ich adresy nájdete na webových stránkach spoločnosti "Nová pošta". Tovar si môžete vyzdvihnúť sami na najbližšej pobočke alebo si objednať doručenie kuriérom na vašu adresu. Kuriérske ceny za doručenie sú uvedené aj na webových stránkach „Nová pošta“.

Prítomnosť výdajného miesta určitej doručovacej služby vo vašej lokalite, možnosť cieleného doručenia, skontrolujte na webovej stránke vybraného prepravcu.

Upozorňujeme na možnosť doručenia tovaru zadarmo. Pri zadávaní objednávky sa obráťte na našich manažérov a ujasnite si, či je vami vybraný tovar zahrnutý v zozname poštovného zadarmo.

Mestá, kde je možné doručenie:

Kyjev, Belaya Cerkov, Boryspil, Brovary, Sevastopol, Simferopol, Kerch, Evpatoria, Feodosia, Jalta, Vinnitsa, Balanovka, Ladyžin, Lutsk, Vladimir-Volynskij, Kovel, Novovolynsk, Dnepropetrovsk, Dneprodzeržynsk, Žlté vody, Kryvyj Marij , Pavlograd, Doneck, Avdeevka, Gorlovka, Makeevka, Mariupol, Slavyansk, Zhitomir, Berdichev, Korosten, Novograd-Volynsky, Užhorod, Beregovo, Mukačevo, Rakhiv, Svalyava, Tyachevopol, Khust, Zaporozhye, Berdyansk, Ivan Krivoj , Burshtyn, Kalush, Kolomyya, Kirovograd, Alexandria, Lugansk, Alchevsk, Anthracite, Krasnodon, Krasny Luch, Lisichansk, Sverdlovsk, Severodonetsk, Lviv, Drohobych, Borislav, Truskavets, Chervonograd, Nikolaev, Odessa, Belgorod- Dnestly Južnyj, Poltava, Kremenčug, Lubny, Presne, Sumy, Achtyrka, Konotop, Trostjanets, Šostka, Ternopil, Charkov, Barvenkovo, Balakleya, Izium, Lozova, Khmelnitsky, Kamenec-Podolskij, Čerkasy, Novgorod Severský, Priluki vtsy, Novodnestrovsk, Pervomaisk.

Darčeky je jemný, hygroskopický a na svetlo citlivý žltý prášok.

Sada reagencií by mala zabezpečiť rast testovacích známok Vibrio cholerae cholerae 01 skupina P-1 (145), Vibrio cholerae eltor 01 skupina M-878 (890), Vibrio cholerae non 01 P-9741 po inokulácii 0,1 ml mikrobiálnej suspenzie každého testu - kmeň po 12-14 hodinách inkubácie pri 37 ° C vo forme hladkých, priesvitných kolónií s modrastým nádychom v prechádzajúcom svetle. s priemerom najmenej 1,0 mm.

Určené na izoláciu pertussisového mikróbu z infikovaného materiálu a kultiváciu kmeňov.

Zlúčenina: pankreatický hydrolyzát kazeínu, chlorid sodný, uhličitan sodný, dehydratovaný fosforečnan sodný, extrakt z kŕmnych kvasníc, mikrobiologický agar.

Príprava:Živné médium v množstve uvedenom na štítku sa dôkladne rozmieša v 1 litri destilovanej vody, za občasného miešania sa varí 2 - 3 minúty, kým sa agar úplne neroztopí. Filtruje sa cez filter z bavlnenej gázy, naleje sa do injekčných liekoviek a sterilizuje sa v autokláve 20 minút pri teplote 120 ° C.

Vitamíny v presne predpísaných dávkach. Ako zdroje dusíka používajú aminokyseliny. Výhodou týchto médií je, že majú stále zloženie, dajú sa použiť na stanovenie potreby mikróbov v určitých živinách.

Pevné kultivačné médiá sa pripravujú z kvapalných médií s prídavkom tesniaceho prostriedku. Ako tmel sa zvyčajne používa agar-agar. Agar-agar - produkt získaný z morských rias, je žltkastý prášok alebo doštička, obsahuje vysokomolekulárne polysacharidy, nerozkladá sa väčšinou mikroorganizmov, nerozkladá sa počas autoklávovania, nemení výživovú hodnotu média, neinhibuje rast mikróbov. Pre imunologické a bakteriologické polia sa používa zmrazený, vyčírený agar, ktorý sa topí pri teplote 85 - 100 ° C pri varení alebo autoklávovaní zmesi prášku s vodou a po ochladení na 45 - 48 ° C vytvára gél.

Na prípravu pevného výživného média sa pridá agar-agar v koncentrácii 1,5 až 3%.

Jednoduché prostredie.

Mäsový peptónový bujón (BCH) je bielkovinovým základom všetkých médií.

Existuje niekoľko spôsobov, ako pripraviť BCH:

a) v mäsovej vode s prídavkom hotového peptónu - ide o takzvaný mäsovo-peptónový vývar;

b) na trávenie produktov hydrolýzy suroviny pomocou enzýmov (trypsín - Hottingerov bujón, pepsín - Martinov bujón).

Sú vhodné na prepravu, je možné ich dlhodobo skladovať, zbaviť laboratóriá obrovského procesu prípravy médií a priblížiť ich k riešeniu problému štandardizácie médií. V lekárskom priemysle sa vyrábajú suché látky Endo, Levin, Ploskirev médiá, agar na báze siričitanu bizmutitého, živný agar, sacharidy s indikátorom BP a ďalšie.

Termostaty

Na kultiváciu mikroorganizmov sa používajú termostaty.

Termostat je zariadenie, ktoré udržuje konštantnú teplotu. Zariadenie sa skladá z ohrievača, komory, dvojitých stien, medzi ktorými cirkuluje vzduch alebo voda. Teplota je regulovaná termoregulátorom. Optimálna teplota na reprodukciu väčšiny mikroorganizmov je 37 ° C.

Spôsob prípravy agaru na platni

MPA sa roztaví na vodnom kúpeli a potom sa ochladí na 50 - 55 ° C. Hrdlo fľaše je spálené v plameni liehovej lampy, Petriho misky sa otvoria tak, aby hrdlo fliaš vniklo, bez dotyku s okrajmi pohára, sa naleje 10 - 15 ml MPA, zatvorí sa veko, pretrepte pohár tak, aby bolo médium rovnomerne rozložené, ponechané na vodorovnej ploche až do stuhnutia. Po vysušení sa agarové platne uložia na chladné miesto.

Výsev slučky

Kvapka materiálu sa odoberie sterilne ochladeným očkom, jeden okraj pohára sa otvorí ľavou rukou, očko sa vloží dovnútra a na opačnom okraji sa na jednom mieste urobí niekoľko ťahov, potom sa očko odtrhne a materiál sa naočkuje rovnobežnými ťahmi od jedného okraja pohára k druhému v intervale 5-6 mm. Na začiatku inokulácie, keď je na slučke veľa mikróbov, dôjde k ich splývavému rastu, ale pri každom zdvihu mikróbov na slučku je ich čoraz menej a zostanú osamelé a poskytnú izolované kolónie.

Výsev podľa Drygalského metódy

Táto metóda sa používa pri sejbe materiálu hojne naočkovaného mikroflórou (hnis, výkaly, spútum). Na výsev podľa Drygalskyho metódy vezmite lopatku a niekoľko pohárov (3-4). Tmel- Toto je nástroj vyrobený z kovového drôtu alebo sklenenej tyčinky, ohnutý vo forme trojuholníka alebo v tvare písmena L. Materiál sa zavedie slučkou alebo pipetou do prvého pohára a rovnomerne sa roztiahne špachtľou po povrchu média, tou istou špachtľou sa bez toho, aby sa spálila, vtiera materiál do živného média v druhom pohári a potom do tretia. S touto inokuláciou dôjde k sútokovému rastu v prvej miske a izolované kolónie budú rásť v ďalších miskách.

Izolácia čistej kultúry podľa Shchukevicha

Na výsev vezmite čerstvo pripravené živné médium s kondenzátom. Materiál, ktorý je predmetom štúdie, sa odoberie pomocou slučky a opatrne sa zavedie do kondenzačnej vody pri dodržaní pravidiel aseptiky bez toho, aby sa dotkli média a stien. Baktérie s vysokou mobilitou sa „plazia“ na mokrý povrch agarového šikmého povrchu.

V dôsledku samostatnej práce by študent mal vedieť:

1. Klasifikácia, morfológia húb, metódy ich štúdia.

2. Klasifikácia a morfológia aktinomycét.

3. Pravidlá protiepidemických režimov a bezpečnostné opatrenia.

Byť schopný:

1. Diferencovajte mikroorganizmy mikroskopicky.

2. Mikroskopické vyšetrenie zafarbených prípravkov.

3. Dezinfikujte materiál, ošetrujte ruky dezinfekčnými prostriedkami.

4. Pripravte si prípravky z čistých kultúr.